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第三节 发酵过程的工艺参数控制 张绪元 知识目标: 掌握发酵过程中的主要参数 了解这些参数的检测手段 能力目标: 能正确地填写发酵工段记录表 职业目标: 具备发酵看罐工的职业素养 重点: 发酵过程中的主要工艺参数 难点: 基质浓度的测定 1.2 压力 防止杂菌进入罐内 增加氧气的饱和溶解度,有利于氧气的传递。 发酵罐压一般为 0.02~0.05Mpa。为什么不再加大? 1.3 搅拌功率 与液相体积氧传递系数有关。 生产上:一般用瓦特计直接测量电动机的耗用功率,从中减去各项传动摩擦所损耗的功率。对小罐,误差较大。用电阻应变式动力计测量。 kW/m3 1.4 搅拌速度 影响液相体积氧传递系数 发酵液均匀度 泡沫的程度 一般发酵罐体积越大转速越低 罐体积 转速(r/min) 通风量(m3/m3. min ) 50L 550 1:0.6 50000L 110 1:0.12 1.5 空气流量 气体流量用转子流量计测量。 绝对流量:单位时间内通入发酵罐中无菌空气的体积 相对流量:指每分钟单位体积发酵液通进无菌空气体积。 。 1.6 表观黏度 是细胞生长和细胞形态的一项标志,它的大小可改变氧传递的阻力,又可表示相对菌体的浓度。单位:Pa.s 2.化学参数 2.1 pH 发酵液的pH是发酵过程中各种产酸和产碱的生化反应的综合结果,是发酵控制的重要参数之一。 影响生长和合成 变化可反应菌体代谢状况。 在线测定(pH电极)和离线测定(pH计)。 2.2 基质浓度 指营养成分的浓度,发酵过程中必须定时测定还原糖,总糖,磷酸盐、氮(氨基酸或氨氮)等基质的浓度。(取样口) 2.2.1糖浓度 总糖 还原糖:菲林试剂法 2.2.2氮浓度 总氮 氨基酸:硼酸吸附法 2.2.3 磷酸盐含量 钼酸铵比色法 2.3 溶解氧浓度 溶解氧浓度:mmol/L, mg/L, ppm或用% (指饱和浓度的百分数)表示。利用它的变化可了解生产菌对氧利用的规律也能反映发酵的异常情况。 相对溶解氧浓度:培养液中的溶解氧浓度与在相同条件下未接种前发酵培养基中溶解氧浓度比值的百分数表示。 2.4产物的浓度 产物的浓度:ug/ml,代谢是否正常,是否放罐(取样) 生产中合成期产物的浓度需要测定 如柠檬酸生产用NaOH滴定, 抗生素用抑菌圈大小测定。 2.5废气中氧和二氧化碳的浓度 废气中氧和二氧化碳的浓度:用顺磁氧分析仪测定氧气的浓度,用红外二氧化碳分析仪测定二氧化碳浓度,如氧气减少和二氧化碳增加表明是好氧代谢的结果。 对不同浓度、不同气体 (SO2、NOX、CO2、CO、CH4等)的高精度连续检测。 3. 生物参数 3.1.菌丝形态:观察菌丝形态是生产 中最常用的方法。每隔8小时镜检, 能及时发现异常染菌。如青霉素生 产,生产菌生长分为I.孢子发芽, II.菌丝增殖,III.菌丝分枝旺盛, 出现脂肪颗粒,IV.菌丝生长减缓, 细胞内出现小气泡,V.气泡增大, 颗粒消失,产物形成,VI.气泡延伸 ,菌丝自溶。 主要指标: 菌丝形状 菌丝粗细 染色的深浅 脂肪颗粒 空泡 发酵过程中的化学参数的测量方法和意义 * 1.物理参数 1.1 温度 温度是指整个发酵过程或不同阶段发酵液所维持的温度。单位:℃和°F。华氏度=32+摄氏度×1.8 利用计算机模拟确定最佳发酵条件,正逐步得到推广应用。 ●根据模拟计算机对发酵温度最佳点的计算,得到青霉素发酵的最适温度是: 起初5h维持在30℃;随后降到25℃,培养35h;再降到20℃培养85h;最后回升到25℃培养40h放罐。 ● 采用这种变温培养,比在25℃恒温培养青霉素产量提高15%。 旋浆式 涡轮式 浆式 锚式 螺带式 发酵过程中的物理参数的测量方法和意义 *
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