扫描电镜在植物方面的应用-遗传.PDF

遗传 HEREDITAS(Beijing) ‘(6):181984 扫描电镜在植物方面的应用 贾 敬 驾 （中国科学院遗传研究所，北京） 扫描电镜在医学和生物学方面的应用日益 用上述方法处理的普通小麦的颖壳、花药、 广泛，其主要优点就是利用它可以获得生物组 叶片等材料，以不同放大倍数进行了扫描电镜 织的立体结构图象，较光学实体显微镜分辨率 观察。在低倍(30OX）镜下观察的颖壳照片，可 高，放大范围广。 它不同于透射电镜的是不受 以看到整个颖壳及其边缘密生着刺毛 （图版1, 样品大小与厚度的影响，为物体组织表面或断 1)；当提高放大倍数 （1,20OX）观察时，则能更 面的精细结构的研究提供了光学显微镜和透射 清楚地分辨出颖壳上刺状毛的形态及颖壳表面 电镜技术所不能得到的大量信息，为研究微观 上的许多瘤状突起物 （图版1,2)；如果用较高 世界开辟了新的领域。 倍 3（,000X）放大扫描观察，则能看到突起的瘤 一般来说，扫描电镜观察的效果，关键的是 状物有的是生长在刺状毛上 （图版 1,3)o 样品的制备。其样品制作技术比较简单，有些 同样，在低倍扫描电镜下观察小麦花药表 硬质材料如木材、种子等稍加处理即可进行电 面的形态特征，能看到许多排列紧密而整齐的 镜观察。因为生物样品大都含水，所以要把样 纹饰 （图版1,4)。这些花纹在高倍扫描时，可 品作适当处理后，方能获得良好的图象。 明显区分出每条纹路由许多条小纹条组成，形 我们以普通小麦的颖壳、花药、叶片等为材 成一个美丽的图案 （图版1,5、6)。可对花药表 料，经过样品制备处理，进行了扫描电镜观察。 面构造的细节观察得更为清楚。 采用了下述程序和方法。 此外，我们用这种技术还对小麦花柱及叶 1．固定 材料用2.5多的戊二醛固定2 片等进行了扫描电镜观察。从图版 1,7中可 小时。 以看到呈丛状的花柱及落在上面的花粉，柱头 2．脱水 用逐级酒精脱水。 分裂成许多长短不一的细茸毛，把落在其中的 3.临界点干燥 应用HCP-2型临界点 花粉粒牢牢的固定住。 千燥装置。(1)用丙酮清洗样品室，吹干后放进 液态 CO：预冷。 (2)剪取与样品杯大小相同 参 考 文 献 的滤纸，放人样品室底部，将已固定的样品放入 ［1〕Franks,F.andH.LeB:Skaer,1576.Nature (Lond.),262,323 样品杯中，将样品杯放入样品室，使液体CO浸 ［2］Robards,A.W.:1978.ElectronMicroscopyand 到样品杯的2/3部位。在60-70个大气压下， CytochemistryofPlantCells,Hall,J.L.(ed). 保持 15分钟。 (3）样品杯加热至400C，当达 Elsevier/North-Holland,BiomedicalPress.Ams- terdam.343-384. 110大气压时，持续5一10分钟，使CO全部气 ［3］Woods,P.S.andM.C.Ledbetter,:1976.］． 化。(4）慢慢打开排气阀门，使压力缓慢下降到 CellSci.,21:47-50. 零。即可得到千燥的样品。 4.真空喷镀 将上述千燥好的样品，进 JiaJingluan:UsingofScanningElectronMicros- 行碳