基底硬度对肝细胞和肝癌细胞迁移行为影响的比较研究-细胞生物学专业论文.docxVIP

重庆大学硕士学位论文中文摘要 重庆大学硕士学位论文 中文摘要 I I 摘 要 目的 通过比较分析不同硬度基底膜上肝细胞与肝癌细胞的迁移特征及其骨 架构象和相关调节分子活性，探索肿瘤细胞迁移行为变化的成因，加深对肿瘤细 胞迁移本质特征的认识。 方法 运用细胞形态学观察，图像分析软件等手段，分别对不同硬度基底上 肝癌细胞，肝细胞迁移净距离、迁移速率、均方位移（Mean-squared Displacement, MSD）、随机运动频率（Random Motility Coefficient, D）、转向角和方向持续性 （Directional Persistence, D/T）等参数进行定量分析；通过免疫荧光、酶谱等实验 技术对不同硬度基底上细胞骨架变化及 MMPs 表达进行检测。 结果 不同硬度基底上 HCCLM3 和 L02 细胞的均方位移趋势一致，相对于极 软（500Pa）和极硬（glass）基底，HCCLM3 和 L02 细胞在较软基底（4000Pa）上 具 有 较 高 的 迁 移 速 率 和 迁 移 净 距 离 ， 且 L02 细 胞 对 运 动 方 向 的 维 持 能 力 较 HCCLM3 细胞高；加入 40μg/mL MMPs 抑制剂 GM6001 后，HCCLM3 细胞的迁移 速率、迁移净距离和对运动方向的维持能力一定程度的降低，L02 细胞的迁移速率、 迁移净距离和对运动方向的维持能力则显著降低；三维胶原基质中，HCCLM3 细 胞 穿 透 基 底 膜 的 个 数 分 别 显 著 多 于 L02 细 胞 穿 透 基 底 膜 的 个 数 ； 加 入 40μg/mLMMPs 抑制剂 GM6001 后，HCCLM3 细胞穿透基底膜的个数显著增加， 而 L02 细胞穿透基底膜的个数显著减少。 结论 二维培养环境中，基底硬度对细胞迁移速率存在双向影响，L02细胞因 有较高的方向持续能力而表现出高的迁移效率；三维胶原基质中，HCCLM3细胞 释放出的阿米巴迁移行为是其具备更大侵袭能力的基础。 关键词：肝细胞，肝细胞癌，基底硬度，迁移特征 重庆大学硕士学位论文英文摘要 重庆大学硕士学位论文 英文摘要 II II ABSTRACT Object To investigate the cause of tumor cell migration by comparing the effect of substrate stiffness on hepatic and hepatoma carcinoma cell migration so as to understand the invasive characteristics of tumor cells. Methods Microscopic morphological observation, immunofluorescence, transwell migration assays and track migration at cellular levels by time-lapse microscope were performed using human hepatoma carcinoma cell lines the HCCLM3 and human hepatic cell lines the L02. Results On 4000Pa substrate, the rates of migration and net translocation of HCCLM3 and L02 cells are higher than 500Pa and glass substrate, the mean-squared displacement of HCCLM3 and L02 cells on different substrates showed consistent tendency, and the directional persistence of L02 cells is significantly higher than HCCLM3 cells; after addition MMPs inhibitor GM6001 (40μg/mL), the rates of migration、net translocation and directional persistence of HCCLM3 cells was decreased lightly, but notably decreased in L02 cells. Intriguingly, the efficient invasion of L02 ce