微生物第6章微生物的遗传变异和育种.pptVIP

第 六 章 微生物的遗传变异和育种;遗传：;表型饰变：;第一节 遗传变异的物质基础;1928年，F.Griffth作了3组实验:;1944年，Avery精确重复了转化实验，确定了转化因子;2、噬菌体感染实验;3、植物病毒重建实验; （一）遗传物质在7个水平上的形式 1、细胞水平 2、细胞核水平 3、染色体水平 4、核酸水平 5、基因水平 6、密码子水平 7、核苷酸水平;真核微生物：细胞核 原核微生物：核区 细胞核或核区的数目在不同的微生物中是不同的;真核生物 细胞核 核染色体 原核生物 核区 DNA链;染色体是由组蛋白与DNA构成的线状结构 染色体的数目在不同的生物中是不同的 染色体的倍数在同一生物的不同生活时期是不同的 ;核酸种类：DNA，RNA 核酸结构：双链、单链； 环状，线状，超螺旋状 DNA长度：因种而异;5、基因水平;6、密码子水平;核苷酸是最小突变单位和交换单位;（二）原核生物的质粒;通常以共价闭合环状(covalently closed circle，简称CCC)的超螺旋双链DNA分子存在于细胞中； 也发现有线型双链DNA质粒和RNA质粒； 质粒分子的大小范围从1kb左右到1000kb； 细菌质粒多 在10kb以内） ;3、质粒的类型;质粒的优点： （1）体积小，易分离和操作 （2）环状，稳定 （3）独立复制 （4）拷贝数多 （5）存在标记位点，易筛选;5、质粒的检测;6、质粒的主要种类;（1）致育因子(Fertility factor，F因子);（2）抗性因子（Resistance factor，R因子）;（3）产细菌素的质粒（Bacteriocin production plasmid）;（4）毒性质粒（virulence plasmid）;（5）代谢质粒（Metabolic plasmid）;假单胞菌： 具有降解一些有毒化合物，如芳香簇化合物(苯)、农药(2,4dichlorophenoxyacetic acid)、辛烷和樟脑等的能力。;（6）隐秘质粒（cryptic plasmid）;第二节 基因突变和诱变育种;（二）突变率 每一世代中发生某一性状突变的几率 （三）基因突变的特点 1、自发性 2、不对应性 3、稀有性 4、独立性 5、可诱变性 6、稳定性 7、可逆性;（四）基因突变自发性和不对应性的实验证明;变量实验（fluctuation analysis） Salvador Luria and Max Delbruck（1943）;变量实验（fluctuation analysis）;Newcombe的涂布实验（1949）;影印实验;微生物的遗传变异和育种;（五）基因突变及其机制;（六）紫外线对DNA的损伤及其修复;（一）自发突变与育种： 选育 定向培育 （二）诱变育种 1、诱变育种的基本环节;2、诱变育种的原则;利用细菌模型了解潜在化学致癌物诱变作用的方法;美国加利福尼亚大学的Bruce Ames教授于1966年发明，因此称为Ames试验 具体操作：检测鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhmurium)组氨酸营养缺陷型菌株(his-)的回复突变率。;微生物的遗传变异和育种;证明Ames试验重要性的应用实例： 国外曾开发了一种降低妇女妊娠反应的药物“反应停”，由于其药效显著，在60-70年代十分流行， 但随后人们就发现畸形儿的出生率明显增高，而且生产畸形儿的妇女大多曾服用“反应停”，后来采用Ames试验发现这种物质的确具有很强的致突变作用，因此这种药物被禁止使用 但如果能在这种药物上市之前就进行Ames试验检测，那么这种大量出生畸形儿的悲剧完全可以避免，;（2）选用优良的出发菌株 （3）处理单细胞或单孢子悬浮液 （4）使用最佳诱变剂量 剂量 = 强度（浓度）× 作用时间 相对剂量 = 杀菌率 （5）利用协同效应 （6）寻找和利用形态、生理与产量间的相关指标 （7）设计高效率筛选方案 （8）根据具体情况创造新型筛选方案;3、突变株的筛选：（1）产量突变株的筛选 （2）抗药性突变株的筛选