课件：肝脏疾病检验.ppt

三、血清胆红素测定 重氮盐法 胆红素氧化酶(BOD)法 高效液相色谱法(HPLC)、 导数分光光度法 直接分光光度计法 测定方法 1．胆红素BOD测定法 (1) 原理: BOD在不同pH条件下催化不同组份的胆红素氧化生成胆绿素，胆绿素与氧进行非酶促反应转变为淡紫色化合物，胆红素的最大吸收峰在450nm 附近。随着胆红素被氧化,450nm下降，下降程度与胆红素浓度成正比。 在pH8.0条件下,未结合胆红素及结合胆红素均被氧化，用于测定总胆红素, 在pH=4.5的酸性条件下，BOD仅能催化结合胆红素和大部分δ胆红素，而游离胆红素不被氧化，测定其含量代表结合胆红素。 【参考范围】 血清总胆红素： 10.26±4.10μmol/L 血清结合胆红素： 2.57±2.56 μmol/L 胆红素μmol/L =胆红素mg/L X 17.1 【临床意义】 1.黄疸及其程度鉴别 2.肝细胞损害程度及与预后 3.新生儿黄疸 4.再障与继发性贫血，胆红素减少 5.结合胆红素与总胆红素比值可用于家鉴别黄疸类型 0.2溶血性黄疸 0.4-0.6 肝细胞黄疸 0.6 阻塞性黄疸 四、血清胆汁酸测定 高效液相色谱法 放射免疫分析法 酶免疫分析法 比色分析测定法 测定方法 酶循环法测定原理为： NAD+ Thio-NAD Thio-NADH 胆汁酸 3-氧代胆汁酸 NADH 3α-HSD 胆汁酸 + Thio-NAD+ 3α-HSD 3-酮类固醇 + Thio-NADH 3-酮类固醇 +NADH 3α-HSD 胆汁酸 + NAD+ 胆汁酸是一类3α羟基类固醇衍生物，可被3α-羟基类固醇脱氢酶及β-硫代烟酰胺嘌呤二甘酸氧化型氧化，微量的胆汁酸在多次酶循环过程中被放大，使得Thio-NADH，在405nm测定Thio-NADH吸光度变化 【参考范围】 1 ～7 μmol/L　(成人空腹血清总胆汁酸) 【临床意义】 任何引起肝细胞损伤的病理过程都可能引起血中胆汁酸升高可见于各种类型的肝病、肝硬化、脂肪肝，也见于急慢性胆道阻塞。其中空腹胆汁酸测定是一种敏感、特异性强并相对简单的肝功能试验，是目前公认最敏感的肝功能试验之一。特别适用于可疑有肝病但其它生化试验正常或轻度异常的病人诊断 急慢性肝炎：显著升高 肝硬化：升高程度高于慢性活动性肝炎，肝病活动降低时，胆红素，转氨酶，ALP转为正常，TBA依然很高 胆汁淤积：不同程度胆汁淤积时TBA升高，而胆红素变化程度不同，引流缓解后，TBA迅速下降，其他指标下降缓慢。 五、血氨测定 为一步法，也叫直接测定即不需从全血中分离出氨即可直接测定 两步法，即先从全血中分离出氨,而后再进行测定； 微量扩散法、离子交换法 酶法和氨电极法 原理： 血浆中的氨在足量α-酮戊二酸和NADPH存在时，经谷氨酸 脱氢酶作用生成谷氨酸,并消耗NADPH，NADPH的下降速率与血浆 氨浓度成正比。 NH3＋α-酮戊二酸＋NADPH 谷氨酸＋NADP+＋H2O 谷氨酸脱氢酶速率法： 谷氨酸脱氢酶 (2) 方法评价： 本法特异性强、分析时间短，是较为理想的氨分析方法。在200 μmol/L范围内、线性良好。精密度：批内CV=3.9%；批间CV=4.5%。回 收率为97.9%～102.7%。　 【参考范围】 血氨测定在诊断治疗肝性脑病中占有重要作用。 【临床意义】 18～72μmol/L　(酶法) 一、肝功能试验选择原则 转氨酶 反映肝细胞损伤功能 蛋白质类：反映肝脏合成功能 总胆红素：反映肝脏排泄功能 总胆汁酸：反映肝脏分泌功能 GGT、ALP 辅助判断肿瘤和胆道通畅状况 二、肝功能试验的分类 第三节 肝功能试验选择原则 一、肝功能试验选择原则 THANK YOU SUCCESS * * 可编辑 * 胆红素在肠道中变化 结合胆红素随着胆汁进入小肠，在小肠内细菌作用下脱掉葡萄糖醛酸再次生成胆红素，胆红素生成胆素原，在小肠里的胆素原可以经过肠肝循环再次到达肝，但这部分的胆素原大部分仍以原形排到肠道，胆素原进一步氧化成黄褐色的胆素，这就是粪便的主要颜色。这部分称为粪胆原。一小部分的胆素原进入体循环，并随尿排出。它是尿颜色的来源之一，是尿液中主要的色素，这部分称为尿胆原。 未结合胆红素的来源与转运： 结合胆红素的来源与转运与代谢： 衰老红细胞 血红蛋白 胆红素代谢紊乱与黄疸 胆红素生成过多或者肝脏处理胆红素能力下降，或对肝脏排泄障碍，都可以使血中胆红素升高，