如何测量食品中添加剂的含量.pptVIP

(一)原理 样品经处理后，在酸性条件下用乙醚提取食品中的糖精钠，经薄层分离后，溶于碳酸氢钠溶液中，于波长270nm下测定吸光度，与标准比较定量。 二、酚磺酞比色法 (一)原理 样品中的糖精钠在酸性条件下用乙醚提取分离后，与酚和硫酸在175℃作用，生成酚磺酞．再与氢氧化钠反应产生红色溶液，与标准系列比较定量。 (三)气相色谱法 糖精难挥发，必须首先和甲基化试剂(碘化甲烷、重氮甲烷等)进行反应生成甲基糖精，然后用气相色谱法测定。 此法检测下限为10ppm，回收率和重现性都很好。 山梨酸又名花楸酸，为无色、无嗅的针状结晶，熔点134℃，沸点228℃。山梨酸难溶于水，易溶于乙醇、乙醚、氯仿等有机溶剂，在酸性条件下可随水蒸汽蒸馏，化学性质稳定。 一、苯甲酸(钠)和山梨酸(钾)的测定 苯甲酸(钠)和山梨酸(钾)的测定方法有薄层色谱法、气相色谱法、高效液相色谱法、紫外分光光度法、酸碱滴定法及硫代巴比妥酸比色法等。 (一)气相色谱法 1．原理 样品经酸化后，用乙醚提取苯甲酸、山梨酸，用附氢火焰离子化检测器的气相色谱仪进行分离测定，与标准系列比较定量。 (二)高效液相色谱法 此法可同时测定苯甲酸、山梨酸和糖精钠。 1．原理 样品经处理后注入高效液相色谱仪中，利用被测组分在固定相和移动相中分配系数的不同，使被测组分分离，用紫外检测器在特定波长下测定被测组分的吸光度，与标准比较定性和定量。 样品处理 汽水：取样l0g放人小烧杯中，微温去除CO2，冷却后用1:1氨水调pH约为7。加水定容成20m1，混匀，经滤膜(HA0.45u)过滤，滤液备用。 仪器 ①高效液相色谱仪 ②进样器：7l0B自动进样器 检测器：M481uv可变波长 高效液相色谱条件： 柱：YWG—C18 4.6×250mm，填料粒径10um 流动相: 甲醇：0.02mol/L乙酸铵(5：95) 流速： 1m1／min或2m1／min 检测器：UV230nm，0.20或0.1AUFS 定性、定量 把样品色谱图与标准色谱图比较，根据峰保留时间定性，按峰面积或峰高定量，定性、定量工作由数据处理机自动进行，井打印出测定结果。 (三)紫外分分光度法则苯甲酸 1．原理 样品中苯甲酸在酸性溶液中可以随水蒸汽蒸馏出来，与样品中非挥发性成分分离，然后用重铬酸钾溶液和硫酸溶液进行激烈氧化，使除苯甲酸以外的其它有机物氧化分解，将此氧化后的溶液再次蒸馏．用碱液吸收苯甲酸，第二次所得的蒸馏液中基本不含除苯甲酸以外的其它杂质。根据苯甲酸钠在225nm有最大吸收，故测定吸光度可计算出苯甲酸含量。 (四)硫代巴比妥酸比色法测定山梨酸 原理 提取出样品中山梨酸及其盐类，在硫酸和重铬酸钾的氧化作用下形成丙二醛，丙二醛与硫代巴比妥酸形成红色化合物，其红色深浅与丙二醛含量成正比，符合比耳定律，于530nm处比色测定。 试剂 ①重铬酸钾—硫酸溶液 ②硫代巴比妥酸溶液 ⑧山梨酸钾标准溶液 仪器 ①分光光度计 ②组织捣碎机 ⑧l0ml比色管 测定方法 ①样品处理：称取l00g样品，加水200m1干组织捣碎机内捣成匀浆。称取匀浆100g，加水200m1继续捣1分钟，称取10g于250m1容量瓶中定容，摇匀、过滤备用。 ②标准曲线绘制 吸取0.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0m1山梨酸钾标准液于250m1容量瓶中，用水定容，分别吸取2.0ml于相应的10m1比色管中，加2m1重铬酸钾硫酸溶液，于100℃水浴中加热7分钟，立即加入2.0ml硫代巴比妥酸，继续加热10分钟，立刻用冷水冷却，在530nm处测吸光度，绘制标准曲线。 ②试样测定：吸取试样处理液2m1于l0ml比色管中，按标准曲线绘制操作，于530nm处测吸光度，从标准曲线上查出相应浓度。 结果计算 山梨酸钾(g／kg) 说明 ①硫代巴比妥酸比色法为AoAc法。样品处理也可采用水蒸汽蒸馏，但操作复杂。本法选用直接提取后进行比色，回收率达90-104％。 ②硫代巴比妥酸需随用随配，山梨酸标准液应贮干冰箱．可使用数日。 ②氧化—显色过程应严格控制条件。 第四节 发色剂—硝酸盐和亚硝酸盐的测定 常用的发色剂是硝酸盐和亚硝酸盐。 亚硝酸盐和硝酸盐添加在制品中后转化为亚硝酸，亚硝酸易分解出亚硝基(NO)，生成的亚硝基会很快与肌红蛋白反应生成鲜艳的、亮红色的亚硝基肌红蛋白(MbNO)，亚硝基肌红蛋白遇热后，放出琉基(一ＳＨ)，变成了具有鲜红色的亚硝基血色原，从而赋予食品鲜艳的红色。同时，亚硝酸盐对抑制微生物的增殖有一定作