课件：第三章蛋白质.ppt

血红蛋白 煤气中毒的机制 ??一氧化碳（CO）也能与血红素Fe原子结合。由于CO与血红蛋白结合的能力是O2的200倍， 免疫球蛋白 免疫球蛋白是一类血浆糖蛋白(serum glycoprotein)。糖蛋白中的蛋白质与糖是共价联接的。 免疫球蛋白是被脊椎动物作为抗体合成的。它的合成场所是网状内皮系统的细胞。这些细胞分布在脾、肝和淋巴节等组织中。 当一类外来的被称为抗原的物质，如多糖、核酸和蛋白质等侵入机体时即引起抗体的产生，这就是所谓免疫反应。抗体就是免疫球蛋白。 免疫球蛋白的结构 免疫球蛋白G ??人的免疫球蛋白可分为五大类，其分子量范围从150000到950000道尔顿。免疫球蛋白M(IgM)是对一个抗原作出反应时产生的第一个抗体。 ??免疫球蛋白G(IgG)是一类最简单的免疫球蛋白。IgG含有两条相同的高分子量的重链(heavy chain)和两条相同的低分子量的轻链(light chain)。 ??四条链通过二硫键共价联接成Y字形结构。每一免疫球蛋白分子含有二个抗原结合部位，它们位于Y形结构的二个顶点。 抗体的特点 ??抗体具有两个最显著的特点，一是高度特异性，二是多样性。 ??高度特异性就是一种抗体一般只能与引起它产生的相应抗原发生反应。抗原—抗体复合物往往是不溶的，因此常从溶液中沉淀出来，此即“沉淀反应”。在体外，沉淀反应已被广泛用于研究抗原—抗体反应，并成为免疫学的基础。多样性就是它们可以和成千上万的各种抗原(天然的和人工的)起反应。 ??—般说来，一个抗原与接受该抗原的动物关系愈远，则产生抗体所需的时间愈短，抗体反应也愈强。 抗原 ??某些低分子量的物质可以与抗体结合，但它们本身不能刺激抗体的产生。如果它们与大分子紧密结合，则能刺激抗体的产生。这些小分子物质称为半抗原(hapten)。 ??几乎所有外来的蛋白质都是抗原，并且每种蛋白质都能诱导特异抗体的产生。一个人的体内在任一个给定时刻大约有10000种抗体存在。 3.6 多肽的化学合成 多肽的合成历史： ??第一兴盛时期： 1907年Fischer 合成18肽Leu-(Gly)3-Leu-(Gly)3-Leu-(Gly)9 ?? 第二兴盛时期： 1932年Bergmann 开发了氨基的保护基 ?? 第三兴盛时期： 1950年左右合成天然生理活性多肽 以上合成采用的是液相合成法 ?? 1963年：Merrifield 开发了固相合成法,合成(Leu-Ala-Gly-Val)。 多肽的化学合成 氨基酸两个功能性基因(氨基与羧基)，在合成特定的肽键时就存在一问题，要求把另外的基团进行掩蔽，即相应基团的保护。 多肽的化学合成 氨基保护法：能够在温和条件下酰化及去酰基化 1) 叔丁氧基酰基( t-Boc- 或Boc- )：Boc-AA-OH 去保护基：CF3COOH ( TFA ) 2) Fmoc-AA-OH: 去保护基：哌啶 3) 苄氧酰基( CBz- 或Z- )：Z-AA-OH 去保护基：催化氢解（H2/Pd） 多肽的化学合成 羧基保护法： 酯化方法进行保护 1) 苯甲醇酯法( -OBzl )： 去保护基：氢解（H2/Pd）方法。 2) 叔丁醇酯法( -OBut )： 去保护基：TFA 多肽的化学合成 肽键形成方法 1) 羧基活化法 酰氯法(易产生氨基酸消旋化)； 酸酐法(易产生氨基酸消旋化)； 活化酯法（常用的是氨基酸对硝基苯酚酯） 2) 偶联剂缩合法 常用的偶联剂是N,N’-二环已基碳二亚胺(DCC). 此法的优点是消旋化的可能性很小。 DCC（二环己基碳二亚胺）直接接肽 多肽的固相合成法 方法： 是将目标多肽的C-端羧基以共价键形式与一个不溶性的高分子树脂相连，然后以这个氨基酸的氨基作为起点，与另一个氨基酸羧基作用(用DCC作偶联剂)形成肽键。不断重复这一过程，即可得到目标多肽的产物。 优点： 合成效率的提高（简单的洗滤操作--繁琐的分离、重结晶、层析）； 促进了生命科学的发展； 促成了自动合成仪及组合化学的问世。 组合法合成多肽 概念： 巧妙的应用合成策略和程序，从某种单体或单元出发，快速合成大量的寡聚物异构体，并进行生物活性筛选。 组合化学法合成多肽 均分合成法每一个合成步骤分别合成x组中间体，将这些中间体混合均匀后平均分成x份，并分别延长一个结构单元。反应产物再混合均匀分成x份，在延长下一个结构单元，直至完成全部合成。 THANK YOU SUCCESS * * 可编辑 Edman氨基酸顺序分析法 （2）裂解 Edman氨基酸顺序分析法 （3）转化（ATZ不稳定，转化成PTH-aa) 多肽氨基酸顺序自动分析仪 仪器原理：Edman法。 1967液