急性早幼粒细胞白血病膜联蛋白Ⅱ的表达及其临床意义-内科学(血液病学)专业论文.docxVIP

lIill lIill l 11 111 IillllI Y1 91 9900 苏州大学学位论文使用授权声明 本人完全了解苏州大学关于收集、保存和使用学位论文的规定， 即：学位论文著作权归属苏州大学。本学位论文电子文档的内容和纸 质论文的内容相一致。苏州大学有权向国家图书馆、中国社科院文献 信息情报中心、中国科学技术信息研究所(含万方数据电子出版社)、 中国学术期刊(光盘版)电子杂志社送交本学位论文的复印件和电子 文档，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或其他复制手段 保存和汇编学位论文，可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数 据库进行检索。 涉密论文口 本学位论文属 在——年一月解密后适用本规定。 非涉密论文囱 论文作者签名： 日期：印 孓一 导师签名： 日期：墅一，缈． 急性早幼粒细胞白血病膜联蛋白u的表达及其临床意义 急性早幼粒细胞白血病膜联蛋白u的表达及其临床意义 摘要 摘 要 出血是急性早幼粒细胞白血病(acute promyelocytic leukemia，APL)的一个显 著的临床特征。在应用维甲酸及其衍生物诱导治疗APL时期，该病的无病生存率 和总体生存率得到了显著改善，然而出血尤其是致死性重要脏器出血仍是该病患 者早期死亡的主要原因。APL出血的机制复杂，近年研究认为，除了弥散性血管 内凝血((disseminated intravascular coagulation，OIC)和继发性纤溶亢进外，由APL 细胞自身表达、分泌的促纤溶蛋白引起的原发怔纤溶亢进及蛋白裂解作用也是导 致APL出血的重要因素。深入探讨导致APL原发性纤溶亢进的潜在机制将会为临 床治疗提供可靠的理论依据。 膜联蛋白II(Annexin II，Ann II)属于钙依赖性磷脂结合蛋白超家族，是组织 型纤溶酶原激活剂(tissue type plasminogen activator,t-PA)和纤溶酶原的共受体， 介导t-PA催化的纤溶酶生成；Ann II广泛表达于机体多种细胞，包括肿瘤细胞、 内皮细胞等。研究表明，APL细胞表面高表达Ann II，APL细胞较其他低表达Ann II的细胞能够更强的促进依赖t-PA的纤溶酶生成。这提示高表达Ann II可能是APL 细胞促纤溶活性增强的一个重要因素，而Ann II的表达是否与APL患者体内纤溶 活性相关未见报道。 全反式维甲酸(ATRA)和亚砷酸(ATo)分别通过不同的机制诱导APL细胞 向成熟分化或者凋亡最终使该病达到缓解，临床上使用这两种药物后患者的出血 症状迅速得到改善。ATRA或ATO减轻APL出血的作用机制一直是人们研究的热 点。早期研究表明，ATRA和ATO在体内外均可下调APL细胞组织因子(TF) 和癌性促凝物质的表达，抑制其促凝活性，降低了DIC和出血的发生率。近几年 体外试验结果表明，ATRA和ATO与APL细胞作用后，APL细胞Ann II的表达 下降，同时其促纤溶酶生成的能力也明显降低。这些结果提示诱导治疗可通过纠 正APL细胞的促纤溶活性降低患者出血发生率。然而ATRA和ATO是否在体内具 有同样的作用未见报道。 本文选择初治APL36例，留取治疗前骨髓细胞，分别用流式细胞术和western 摘要 摘要 急性早幼粒细胞白血病膜联蛋白¨的表达及其临床意义 blotting检测APL细胞Ann II蛋白的表达，real time．PCR检钡：JAPL细胞Ann II的mRNA 含量；发色底物法检测细胞的促纤溶活性，并与其他类型急性白血病64例比较， 分析APL细胞促纤溶活性的改变及与Ann II的表达有无关联。结果发现：①所有急 性髓系白血病细胞均可检测到A衄II抗原的表达，其中急性单核细胞白血病(M5) 与APL细胞的表达最高，平均荧光强度(mean fluorescence intensity，MFI)分别为 9．93士2．23(n_12)及9．79士2．44(n_12)，二者之间无统计学差异； AML．Ml、M2、 M4细胞表面AnnII的表达较低，平均荧光强度分别为： 3．19士0．56(n_lO)、 3．38士0．76(n=11)、3．05士0．68(n=10)。急性淋巴细胞白血病细胞表面Ann II的表达 与正常对照骨髓细胞比较无差异，其中ALL．B为1．12士O．65(n=10)，ALL．T为 0．5士0．26(n=11)。Westem blotting显示APL细胞及M5细胞裂解液上样区可见一大小 约为36Kd的特异性条带，其灰度明显强于其他白血病细胞裂解液上样区。②发色 底物法检测上述不同类型急性白血病细胞的促纤溶活性，APL细胞和M5细胞促进 依赖t-PA的纤溶酶生成的能