急性白血病中hMSH2 mRNA表达及P53蛋白表达的研究-血液内科专业论文.docxVIP

塑丛盔堂!璺竖昼亟主望些堡奎 塑丛盔堂!璺竖昼亟主望些堡奎 叁丝皂堕堕主!丛墨坚!型堕垒塞垄垦堕!里竖垄堕里堕 急性白血病中hMSH2 mRNA表达及P53蛋白表达的研究 研究生林晓燕 导师邹典斌 郑州大学第一附属医院血液内科 摘 要 目的；错配修复(mismatch repair，MMR)基因的功能主要是维持基因组稳定。 DNA复制时会产生一些不配对的碱基对。MMR基因则负责修复这些错配碱基。 当错配修复功能缺陷时细胞就会产生突变表型。人们在家族性非息肉性结肠癌的 研究中认识了MMR基因突变，研究者发现人类MMR基因突变多集中在hMSH2。 hMSH2是人类细胞中与E．Coli．MutS同源基因。近年来研究发现hMSH2在白血 病中亦有一定突变率。这提示hMSH2缺陷可能是引起造血祖细胞恶性克隆增殖的 原因之一。有关hMSH2表达缺失与急性白血病发生、发展的关系目前国内少见报 道。在错配修复功能缺陷的细胞株中已发现p53基因突变率明显增高，研究者推 测MMR基因缺陷会引发p53基因突变积累，从而促进恶性肿瘤的发展。野生型 p53基因为肿瘤抑制基因，是人类恶性肿瘤中最常改变的基因之～。p53基因产物 在修复DNA损伤时也起重要作用，目前已有很多研究证实急性白血病存在p53 基因点突变。突变型P53蛋白可以通过免疫细胞化学法检测出。本文对急性非淋 巴细胞白血病(ANLL)，急性淋巴细胞白血病(ALL)及对照组患者的骨髓单个核细 胞的滴片进行寡核苷酸探针原位杂交法检测hMSH2基因转录出的mRNA，免疫 细胞化学法检测突变型P53蛋白，以探讨hMSH2 mRNA及突变型p53蛋白的表 达与急性白血病发病之间的关系。 塑丛奎堂兰Q坚旦堡圭望些堡塞 塑丛奎堂兰Q坚旦堡圭望些堡塞 鱼丝自堡壅主j竺曼旦兰型坠坠墨垄垦￡墅曼皂耋垄鲤婴塞 材料与方法：研究对象分为三组；①初治ANLL患者37例，男性24例、女性13 例，平均年龄37岁，其中M14例、M218例、Ms5例、M47例、M53例。②初治 ALL患者26例，男性15例、交陛11例，平均年龄28岁。③对照组25例，男性 12例、女性13例，平均年龄35岁，均为骨髓象正常的非肿瘤患者。所有急性白 血病患者的分型均依据1986年FAB制定的MIC分型标准制定划分。该实验采集 白血病患者及对照者的骨髓2ml，经淋巴细胞分离液分离单个核细胞制成滴片， 用生物素化鼠抗地高新标记的原位杂交法检测hMSH2转录出的mRNA在各组问 的表达百分比，免疫细胞化学法检测突变型p53蛋白在各组间的表达百分比。所 得结果用SPSSl0．0统计软件包处理，采用方差分析检验，直线相关分析，取o= 0．05为显著性检验水准。 结果：(1) ANLL组、ALL组、对照组骨髓细胞中hMSH2的mRNA检测结果： 对照组、ANIJ，组、ALL组hMSH2的mRNA表达百分比依次降低，以(x±s) 表示，分别为(64．22±8．51)％，(53．98--+9．69)％，(32．88±11．46)％。三组之间表 达百分比差异均有统计学意义(P0．05)。(2)ANLL组、ALL组、对照组骨髓细 胞中突变型P53蛋白检测结果：各组骨髓细胞中突变型P53蛋白表达百分比依次 升高，以(x is)表示，对照组、ANLL组、ALL组骨髓细胞的突变型p53蛋白表 达百分比分别为(12．63-t-6．66)％、(21．50-t-7．72)％、(29．25-1-9．45)％。ALL组表 达百分比高于对照组，差异有统计学意义(PO．05)；ANLL组表达百分比高于对 照组，差异有统计学意义(PO。05)。(3)ANLL、趾上患者不同年龄组之间hMSH2 mRNA检测结果：以55岁为界线将ANLL、AU。分别划分为高龄组及低龄组， 分别分析ANLL、ALL中年龄因素对hMSH2表达的影响。结果显示ANLL高龄 组与ANLL低龄组hMSH2 mRNA表达百分比以(爻±s)表示分别为(46．97_+7．21) ％、(58．25±8．51)％。经t检验ANLL高龄组与ANII，低龄组有显著性差异 (P0．05)。ALL高龄组与ALL低龄组hMSH2的mRNA表达百分比以(x±s) 表示分别为(38．4+8．17)％、(31．88+11．83)％。应用t检验，结果显示AI工高 龄组与ALL低龄组无显著性差异(PO．05)。(4)ANLL、AI工患者不同年龄组 之间突变型P53蛋白表达的差异：以55岁为界线将ANLL、ALL分别划分为高龄 塑型盔堂兰塑兰旦堡主兰些垒塞 塑型盔堂兰塑兰旦堡主兰些垒塞 鱼丝自些堕生!坚苎墼竺垦坠耋姿垦芭!曼旦垂垄塑竺錾 组及低龄组，分别分析ANLL、魁上中年龄因素对突变型P53蛋白表达的影响。 ANLL高龄组与ANL