高乌头药材生药学分析.docxVIP

　　1试验材料11高乌头药材。 　　高乌头分别购于甘肃、青海等地，经甘肃中医药大学药学院杨扶德教授鉴定为毛茛科乌头属植物高乌头的干燥根，结果见表1。 　　12仪器与试剂。 　　125电子天平赛多利斯科学仪器有限公司；3200超声波清洗器昆山市超声仪器有限公司；-400高建万能粉碎机北京科伟永兴仪器有限公司；-生物显微镜；-11数显恒温水浴锅上海宜昌仪器纱筛厂；51荧光显微镜；-3循环水多用真空泵郑州杜甫仪器厂；旋转蒸发仪；多功能暗箱式紫外分析仪北京赛百奥科技有限公司；4自动点样仪、称量瓶、干燥器等。 　　高乌甲素对照品购自甘肃神龙药业股份有限公司，批含量9750；冉乌头碱；三氯甲烷、氨水、正己烷、异丙醇、水合氯醛、甘油、95乙醇、乙酸乙酯均为分析纯。 　　2方法与结果21外观性状高乌头根呈圆柱形，上粗下细，稍扁扭曲不直，有分枝，长短不一，长5~20，直径1~4。 　　表面棕褐色至棕黑色，粗糙，有时因后生皮层脱落露出木质部，扭裂，顶端有凹陷的茎痕或留有茎的残基，周围有时残存棕色叶鞘纤维，有明显的网状纵向裂隙，有的可见腐朽的空腔，有不规则纵纹。 　　质轻而松脆，易折断，断面淡黄棕色，呈蜂窝状或中空。 　　气微，味苦。 　　22显微鉴别。 　　221横切面显微鉴别取干燥高乌头个子药材，用水浸泡，待药材浸透软后，取直径为2~4根末端，冷冻后徒手切片。 　　将制备好的切片置显微镜下观察，可见木栓层为2~5列木栓化细胞组成；皮层较宽广，约占整个根部的23，皮层中有一轮异型维管束环状排列，分布在皮层中，维管束均为外韧型；韧皮部细胞较小，排列紧密，束中形成层细胞数列，而束间形成层不明显；形成层细胞2~3列；木质部导管作径向排列，直径14~60μ，异型维管束之间的维管射线宽广，射线细胞中夹杂有小型棕色细胞径向排列成行；次生维管束呈圆柱形，韧皮部较宽广。 　　薄壁细胞中分布大量的淀粉粒及少量的草酸钙方晶。 　　结果见图1。 　　222粉末鉴别取样品粉碎过4号筛，得棕褐色粉末，挑取少许置载玻片上，加2~3滴水合氯醛在酒精灯上透化后，盖上盖玻片，置显微镜下观察，可见大量的淀粉粒，多为单粒，呈圆形、类圆形或半圆形，直径为4~24μ；大粒有明显的脐点，呈星状或叉状，层纹不明显；复粒由2~4个分粒组成。 　　后生皮层组织碎片呈棕褐色，细胞表面呈多角形或类方形，壁木栓化或木化，有时细胞壁弯曲直径为25~220μ。 　　网纹导管及具缘纹孔导管，直径为20~45μ。 　　常有棕色块状物散在。 　　草酸钙方晶少见，呈菱形或多边形。 　　结果见图2。 　　23薄层鉴别。 　　231不同提取溶剂的考察取高乌头药材粉末2过三号筛2份，一份加95乙醇30超声处理功率300，频率40，水温25℃以下30，放冷，补足失重，摇匀，滤过，取续滤液25，40℃以下减压回收溶剂至干，残渣加入甲醇3，溶解，密塞，摇匀；另一份加氨试液3，再加入异丙醇-乙酸乙酯1∶1混合溶液50，称定质量，超声处理功率300，频率40，水温25℃以下30，放冷，补足失重，摇匀，滤过，取续滤液25，40℃以下减压回收溶剂至干，残渣加入甲醇3，溶解，密塞，摇匀。 　　分别进行薄层色谱鉴别。 　　结果后者色谱斑点更为清晰。 　　232展开剂系统的选择分别以二甲苯-甲醇5∶1、正己烷-乙酸乙酯-甲醇10∶8∶25、甲苯-三氯甲烷-甲醇1∶8∶1、正己烷-三氯甲烷-甲醇4∶8∶1、正己烷-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇5∶6∶8∶15等展开系统进行试验，结果显示以正己烷-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇5∶6∶8∶15为展开剂，置氨蒸气饱和20后展开，展开效果较好，斑点集中且分离好，值适中。 　　233薄层板的选择分别筛选了硅胶、硅胶254薄层板，结果显示选用硅胶254薄层板时斑点清晰。 　　234不同温湿度对薄层色谱的影响考察不同温湿度对薄层色谱的影响，结果表明在温度为30℃下，相对湿度在45~60，均可使主斑点分离较好，斑点集中、清晰，且比移值变化不大。 　　通过上述条件的考察，得到稳定的薄层色谱鉴别条件取高乌头药材粉末各2过3号筛，精密称定，置具塞锥形瓶中，加氨试液3，再加入异丙醇-乙酸乙酯1∶1混合溶液50，称定质量，进行超声处理功率300，频率40，水温25℃以下30，放冷，补足失重，摇匀，滤过，取续滤液25，40℃以下减压回收溶剂至干，残渣加入甲醇3，溶解，密塞，摇匀，作为供试品。 　　另取冉乌头碱及高乌头甲素对照品，分别加甲醇溶解制成每1含1溶液，作为对照品溶液。 　　按照薄层色谱法实验，分别吸取冉乌头碱、高乌甲素对照品、各批次供试品各5μ，分别点于同一硅胶254薄层板上，以正己烷-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇5∶6∶8∶15为展开剂，置氨蒸气饱和20后展开，取出，晾干，分别置紫外光灯254及365