基隆潮境公园沿海破囊壶菌多样性及其多不饱和脂肪酸研究-海洋生物学专业论文.docxVIP

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万方数据 万方数据 独 创 性 声 明 本人郑重声明:所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工 作及取得研究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方 外,论文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果,也不包含为获得 宁波大学或其他教育机构的学位或证书所使用过的材料。与我一同工作 的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中做了明确的说明并表示了 谢意。 若有不实之处,本人愿意承担相关法律责任。 签名: 日期: 关于论文使用授权的声明 本人完全了解宁波大学有关保留、使用学位论文的规定,即:学校 有权保留送交论文的复印件,允许论文被查阅和借阅;学校可以公布论 文的全部或部分内容,可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。 (保密的论文在解密后应遵循此规定) 签名: 导师签名: 日期: 宁波大学硕士学位论文 基隆潮境公园沿海破囊壶菌多样性及其多不饱和脂肪酸研究 摘 要 多不饱和脂肪酸(polyunsaturated fatty acids,PUFAs)是具有非常重要的重要生物活 性的一类脂肪酸,其在维持细胞膜功能,促进眼睛及大脑发育,预防心脑血管疾病等许多 方面都能直接或间接得起到良好的作用。另外,多不饱和脂肪酸还是组成神经、视觉和生 殖细胞膜等生物体重要器官组织的膜结构磷脂中的重要成分。然而,对于一些具有重要作 用的多不饱和脂肪酸,人体自身不能合成,只能从日常膳食中摄取,特别是在了解了多不 饱和脂肪酸的作用后,人们对其需求越来越大。鱼油作为传统的多不饱和脂肪酸来源,由 于存在诸多限制,已经不能满足人们对多不饱和脂肪酸的需求。于是现在急需一种能够适 用于工业生产的新的多不饱和脂肪酸来源。研究发现,破囊壶菌(thraustochytrids)中含有 丰富的多不饱和脂肪酸,可开发成为代替鱼油的新的多不饱和脂肪酸来源,于是研究者对 破囊壶菌的关注研究日益深入,特别是对红树林地区的破囊壶菌的研究。 本课题选择的是研究较少的海洋漂浮有机质上的破囊壶菌进行研究。采样地点在台湾 基隆潮境公园地区,采集的样品主要为存在于该地区的较为丰富的藻类,另外还包括海洋 中漂浮的腐木等其他有机质。采用的筛选方法为花粉诱导法,并通过 ITS 序列对菌种进行 鉴定。经研究发现该地区的破囊壶菌主要为破囊壶菌属(Thraustochytrium)、裂殖壶菌属 (Schizochytrium)和 Aplanochytrium 属。通过对 6 个月的样本分析,全年破囊壶菌在种属 分布上没有明显的差异,但是 2013 年 11 月以 Aplanochytrium 属为主,2014 年 3 月、7 月 以 Thraustochytrium 属为主。 通过对 Thraustochytrium 属和 Schizochytrium 属的破囊壶菌生物量及脂肪酸分析发现, 裂殖壶菌属的生物量明显高于破囊壶菌属,而且两个属在脂肪酸组成及含量上差异也非常 明显。破囊壶菌属含有高比例的二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA) 和 C16:0 (软脂酸),含有少量甚至不含有二十碳四烯酸(arachidonic acid,ARA),裂殖壶菌属 则含有较高的 ARA。裂殖壶菌属的 DHA 所占比例虽然明显低于破囊壶菌属,但是由于裂 殖壶菌生物量高,所以 DHA 的产量比破囊壶菌属的高。另外,在两个属的菌中都存在着 I 基隆潮境公园沿海破囊壶菌多样性及其多不饱和脂肪酸研究 特殊的脂肪酸,C18:1(ω-7)的脂肪酸仅存在于破囊壶菌属,在裂殖壶菌属中不含有或含量 稀少,而 C18:3(ω-6)、C19:1(ω-9)和 C20:4(ω-3) 的脂肪酸仅存在于裂殖壶菌属,在破囊壶 菌属中不含有或含量稀少。这些特殊的脂肪酸或可用以作为区分这两个属菌株化学分类学 的生物标志物,为菌种鉴定提供一种理论基础。 研究中发现了菌株 MT004 含有占总脂肪酸达 56%以上的 DHA,并且脂肪酸种类单 一,易纯化,而菌株 MT021 则有较高的 DHA、EPA、ARA 产量,这两株菌皆可通过优化 培养、生物工程等技术方法,提高生物量,培育为高产菌株。 关键词:藻类,破囊壶菌属,裂殖壶菌属,脂肪酸 II - 宁波大学硕士学位论文 The Diversity and Fatty Acids Analysis of Thraustochytrids Isolated from Chaojing Park in Keelung Abstract The polyunsaturated fatty acids (PUFAs), one of an important bioactive substance, play an important role in mainta

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