人教版高中生物选修1教学课件.ppt

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鸡血细胞液10mL, 注入到50mL烧杯中 加入蒸馏水20mL 玻璃棒沿一个方向快速搅拌5min 用3~4层纱布的过滤,取其滤液备用。 讨论: 答:让细胞内浓度大于周围溶液的浓度,细胞会吸 水以至胀破 (1)为什么要加入蒸馏水?加入蒸馏水后细胞 会有什么变化? (2)用玻璃棒搅拌有什么意义? 答:用玻璃棒搅拌可以加速血细胞和细胞核的破裂。 注意应沿一个方向快速搅拌,但也不能太快太 猛,防止打碎DNA (3)滤去的是什么物质?得到的是什么? 答:过滤将滤去的是细胞膜和核膜等物质;得到的是 与蛋白质等物质结合在一起的DNA ②溶解细胞核内的DNA 将物质的量浓度为 2mol的氯化钠的溶液40mL加入到滤液中,并用玻璃棒沿一个方向搅拌1min,使其混合均匀,这时DNA在溶液中呈溶解状态 沿烧杯内壁缓缓加入蒸馏水,同时用玻璃棒沿一个方向不停地轻轻搅拌,这时烧杯中有丝状物出现,注意观察丝状物呈什么颜色。继续加入蒸馏水,溶液中出现的粘稠物会越来越多。当粘稠物不再增加时停止加入蒸馏水(这时溶液中氯化钠的物质的量浓度相当于0.14 mol/L) ③析出含DNA的粘稠物 讨论:加入蒸馏水的目的? 降低NaCl溶液浓度到使DNA溶解度最低点,使DNA从NaCl溶液中析出 将溶液中的DNA与其他杂质分离,这一步骤是实验成败的关键。实验中应该缓慢贴壁加入蒸馏水,并轻轻地沿一个方向不停地均匀搅拌,以利于DNA分子的附着和缠绕 注意事项: ④滤取含DNA的粘稠物 用放有多层纱布的漏斗,过滤步骤3中的溶液至 1000mL的烧杯中,含DNA的粘稠物被留在纱布上 ⑤将DNA的粘稠物再溶解 取1个50mL烧杯,向烧杯内注入氯化钠的物质的量浓度为2mol/L的溶液20mL。用钝头镊子将纱布上的粘稠物夹至氯化钠溶液中,用玻璃棒沿一个方向不停地搅拌3min,使粘稠物尽可能多地溶解于溶液中 注入氯化钠浓度为2mol/L的溶液20mL ⑥过滤含有DNA的氯化钠溶液 取1个100 mL烧杯,用放有两层纱布的漏斗过滤步骤5中的溶液。取其滤液,DNA溶于滤液中 ⑦提取含杂质较少的DNA 在上述滤过的溶液中,加入冷却的、酒精的体积分数为95%的溶液50mL(使用冷却的酒精,对DNA的凝集效果较佳),并用玻璃棒搅拌,溶液中会出现含杂质较少的丝状物。用玻璃棒将丝状物卷起,并用滤纸吸取上面的水分。这种丝状物的主要成分就是DNA。注意观察丝状物是什么颜色的。 答:因为DNA不溶于冷酒精,而其他物质可以溶解在 酒精中,使含杂质较少的DNA丝状物可以析出, 悬浮于溶液中 讨论: (2)观察丝状物呈什么颜色? 答:白色 (1)为什么要加50mL的冷酒精? 取两支20mL的试管,各加入氯化钠的物质的量浓度为2mol/L的溶液5 mL,将丝状物放入其中一支试管中,用玻璃棒搅拌,使丝状物溶解。然后,向两支试管中各加入4mL的二苯胺试剂。混合均匀后,将试管置于沸水中加热 5min,待试管冷却后,观察并且比较两支试管中溶液颜色的变化 ⑧ DNA的鉴定 讨论: 有丝状物的试管变成蓝色,另外试管还是原来颜色 (2)这一鉴定结果说明什么问题? (1)比较试管中溶液的颜色有什么不同? 答:提取出的丝状物是DNA (3) DNA的直径约为2nm ,实验中出现的丝状物的 粗细是否表示1个DNA分子直径的大小? 答: DNA分子直径只有2nm。丝状物是多个DNA子聚在一起形成的 答:整个实验共“两次蒸馏水,三次过滤, 两次析出,五次搅拌” 6、讨论: ①两次蒸馏水 第一次:细胞吸水胀破 第一步 第二次:使DNA黏稠物析出 第三步 (1)此实验过程中有几次使用蒸馏水?几次过滤,几次析出,几次搅拌?分别在哪一步? 过滤时使用的纱布层数与需用滤液或黏稠物有关,第二次要用其滤出的黏稠物有关,所以要使用多层纱布,第一次和第三次均要用其滤液,使用的纱布为1-2层 ②三次过滤 第一次: DNA存在于滤液里 第一步 第二次: DNA被留在纱布上 第四步 第三次: DNA存在于滤液里 第六步 ③两次析出 第一次:用0.14 mol/L 的NaCI 溶液含杂质多 第三步 第二次:用冷却的95%的酒精 第七步 ④五次搅拌: 其中除第八步外,其余均要朝一个方向搅拌,在第三、五步搅动还要轻缓,玻璃棒不要直插烧杯底部,这样才能保证得到完整的DNA (2)为什么反复地溶解与析出DNA,能够去除杂质? 答:用高盐浓度的溶液溶解DNA,能除去在高盐中不能溶解的杂质;用低盐浓度使DNA析出,能除去溶解在低盐溶液中的杂质。

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