荧光免疫试验.pptVIP

2.stokes位移:激发光谱和发射光谱的波长差。 stokes位移小，相互干扰，影响结果准确性。 镧系元素Stokes位移大(273nm)，激发光谱和发射光谱不重叠 时间分辨荧光免疫测定 发射光谱带较窄：613nm±10nm，干扰少 激发光谱带较宽：300nm～350nm，灵敏度高 3.发射光谱和激发光谱 时间分辨荧光免疫测定 4.荧光标记物的相对比活性 比活性 ：单位时间内每个标记分子 可被探测到的信号量。 Eu3+螯合物 反复激发 1000次/秒 大大提高了荧光标记物比活性 时间分辨荧光免疫测定 结合β-二酮体 Eu3+解离 酸性增强液 荧光增强 Eu3+标记抗原抗体复合物 5.信号增强 时间分辨荧光免疫测定 （二）标记物和标记方法 时间分辨荧光免疫测定 （三）方法类型 双抗体夹心法 固相抗体竞争法 固相抗原竞争法 时间分辨荧光免疫测定 （三）方法类型 时间分辨荧光免疫测定（双抗体夹心法）示意图 灵敏度高：最小检出量10-18mol/L 分析范围宽：4～5个数量级 标记物稳定：有效使用期长 测量快速，易自动化 易受污染，本底增高 方法评价 时间分辨荧光免疫测定 光线通过偏振滤光片后，形成一个方向的平面光称为偏振光。 偏振荧光(绿光,525nm～550nm) 偏振光(蓝光,485nm) 荧光物质 二、荧光偏振免疫测定 抗原抗体竞争反应