活性枸杞多糖的质量分析研究及其在鉴定枸杞子质量中的应用-生药学专业论文.docxVIP

复旦大掌硕士学位论文中文摘要 复旦大掌硕士学位论文 中文摘要 枸杞子是茄科植物宁夏枸杞Lycium b口barum L．的干燥成熟果实，具滋补 肝肾、益精明目之功效。其应用历史悠久，为我国著名的药食共用产品。但药典 里却缺乏对其活性成分定性定量的质量控制标准，仅收载了以对照药材做薄层色 谱鉴别的方法。根据大量的文献报道，枸杞子中的构杞多糖(LBP)是其主要的免 疫活性成分，具有调节免疫、延缓衰老、抑制肿瘤、保护肝肾等广泛的药理作用。 枸杞子主产于宁夏回族自治区，中宁县又是宁夏枸杞的分布中心。因此，本研究 以中宁县产的枸杞子为研究对象，从中提取枸杞多糖进行深入研究，并以其中的 活性糖缀合物LBGPl为检测指标，建立质量控制方法，为评价枸杞子的质量提供 科学依据。 首先，本研究通过水提醇沉、透析干燥等步骤从枸杞子药材中获得LBP，通 过工艺改进将LBP得率由0．1％逐步提高到1．o％。随后，对LBP进行了高效液相 色谱鉴定，得知LBP中至少含有5个组分及各个组分的分子量。结果表明，不同 批号的LBP中共同含有3个组分，它们的分子量分别为3．5万，1．7万，O．6万， 又表明LBP中有2～4个组分含蛋白质。 首次采用HPCE法对不同产地枸杞子中的LBP以活性糖缀合物LBGPl为对照 品进行了定性鉴别，LBGPl在3．O～3．5min出峰，LBP图谱中，在与LBGPl的相 应位置上存在对应的峰，结果表明枸杞子中含有LBGPl。 依次用苯酚一硫酸法、改良咔唑一硫酸法及元素分析法测定LBP中的中性糖、 糖醛酸及蛋白质含量，以三者之和表明LBP中主要组分的总量。以半乳糖为对照 品，测得中宁LBP中的中性糖含量为42．34～47．69％，回归方程为 Y=6．6283x+0．0005(r=O．9998)，线性范围为11．3～56．5 u g／Ⅲl；以半乳糖醛酸 为对照品，并扣除中性糖在测定糖醛酸时的干扰，测得中宁LBP中的糖醛酸含量 为6．77～7．91％，回归方程Y=6．9378x+0．0030 (r=O．9997)，线性范围为10～ 80 u g／Ⅲl；元素分析测得中宁LBP中的蛋白质含量为3t．50～32．38％。 以上HPLC、HPCE及定量测定的结果，为枸杞子提供了专属性强、重现性好 的质量控制的主要内容。 采用上述枸杞子的质量控制的内容与方法测定了宁夏中宁、新疆、内蒙古、 河北四个产地的枸杞子商品。结果表明：这四个产地的六批枸杞子中均含有 LBGPl；宁夏中宁LBP的得率、中性糖含量、蛋白质含量最高，而新疆的LBP中 糖醛酸含量最高，河北的LBP得率、中性糖含量、糖醛酸含量、蛋白质含量均为 最低，内蒙古的LBP得率、中性糖含量、糖醛酸含量、蛋白质含量均比河北的略 高，而比宁夏中宁的低。从而表明，宁夏中宁是优质枸杞子主要产地之一。 关键词：枸杞子，枸杞多糖(LBP)，LBGPl，HPCE，HPLC，中性糖，糖醛酸，蛋白 质，商品测定 复旦大掌硕士掌位论文Abstract 复旦大掌硕士掌位论文 Abstract #ructus Lycii is a famous Chinese traditional medicine，which has functions of ‘being to benefit the 1iver and the kidney，to replenish vital essence and to improve eyesight’．It has been widely used as health-giving food for 2300 years．However，there is no standard of quality—control for it with its clear active components as detective markers in Pharmacopoeia of the People’s Republic of China up tO now， and only the thin—layer chromatography with Fructus Lyeii as standard has been accepted． According to references，p01ysaccharides from Lycium barbarum L．(LBP for short)is its main immunoactive ingredient，which has various functions of‘adjusting immunity，prolonging 1ife，anti-cancer， prot