脊髓继发性损伤与细胞凋亡关系的实验研究-外科学专业论文.docxVIP

中国医科大学研究生学位论文独创性声明本人申明所呈交的学位论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及 中国医科大学研究生学位论文独创性声明 本人申明所呈交的学位论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及 取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论 文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得我校或 其他教育机构的学位或证书而使用过的材料，与我一同工作的同志对本研 究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。 申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担一切相关责任。 论文作者签名： 日期：兰∥，，夕 中国医科大学研究生学位论文版权使用授权书 本人完全了解中国医科大学有关保护知识产权的规定，即：研究生在 攻读学位期间论文工作的知识产权单位属中国医科大学。本人保证毕业离 校后，发表论文或使用论文工作成果时署名单位为中国医科大学，且导师 为通讯作者，通讯作者单位亦署名为中国医科大学。学校有权保留并向国 家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。学 校可以公布学位论文的全部或部分内容(保密内容除外)，以呆用影印、缩 印或其他手段保存论文。 指导教师签名： 黼 论文作者签名： 脊髓继发性损伤与细胞凋亡关系的实验研究脊髓损伤一直是医学界关注的重点研究方向。以前认为坏死是主要的 脊髓继发性损伤与细胞凋亡关系的实验研究 脊髓损伤一直是医学界关注的重点研究方向。以前认为坏死是主要的 原因，最新的研究显示，细胞凋亡可能参与了脊髓损伤的病理生理过程。认 为凋亡是继发性脊髓损伤细胞死亡的重要途径之一，其作用越来越受到人 们的重视，成为近年来的研究热点之一。凋亡发生的机制尚不完全清楚，有 可能通过多种信号传递通路启动自杀过程。脊髓损伤后，神经元生存的内、 外环境发生了变化，各种因素如细胞外兴奋性氨基酸浓度升高、自由基的大 量产生、细胞内的钙超载以及基因表达的异常等相互交织，有可能存在多条 通路调节细胞凋亡，但上述因素在启动凋亡发生中所占的比重还不清楚，有 待进一步研究阐明。随着分子生物学的发展，应用分子生物学技术对脊髓 损伤凋亡的发生机制、凋亡相关基因的研究及采用多种手段抑制凋亡的发 生有可能是今后的主要任务之一。近年来对于细胞凋亡的调控研究已取得 很大进展，已发现参与调控的基因按其功能可分为两大类：促凋亡基因、抑 凋亡基因。抑制细胞凋亡基因主要有Bcl一2、Bcl—X，和Mcl一1；促进细胞 凋亡基因主要有Bcl一2相关基因Bax和Bcl—Xs、153、C—myc，特别是bcl 一2和bax基因与凋亡的调控关系更为密切。 急性脊髓损伤后可引发二系列的病理生理过程，包括原发性损伤和继 发性损伤，原发性损伤是由外伤当时的环境决定。研究表明细胞凋亡在脊 髓继发性损伤过程中起主导作用，但有关机制尚不清楚。细胞因子和炎症 因子可能参与发病。髓过氧化物酶(Myelopemxidase，MPO)存在于中性粒 细胞(PMN)的嗜天青颗粒中，PMN激活时部分MPO可以释放，因此MPO 可作为中性粒细胞的标志物，敏感地反映出组织中性粒细胞浸润的程度。 为此我们测定脊锈损伤前后TNF一仪及MPO的变化，并探讨其在大鼠脊髓 继发性损伤中的作用机制。 脊髓损伤后细胞凋亡的客观存在更深刻更全面地揭示了脊髓损伤的病 理生理过程，即脊髓损伤后不但存在急性期的细胞坏死，也存在亚急性的细 胞凋亡，使人们对脊髓损伤的病理生理有一个新的认识。利用细胞凋亡规 ·1· 律，有效地调控细胞凋亡，是治疗脊髓损伤的新思路、新途径，其中药物干预 律，有效地调控细胞凋亡，是治疗脊髓损伤的新思路、新途径，其中药物干预 和基因治疗将是最有希望的治疗手段。根据目前的研究结果，开展的治疗 方法很多，细胞凋亡在脊髓继发性损伤过程中起着关键性作用，阻断触发细 胞凋亡的级联反应可减少细胞凋亡，保护幸存细胞，改善神经功能，达到有 效的治疗措施。 血管内皮生长因子是一种高度特异的促血管生长因子，在体内外均能 迅速有效地促进血管内皮细胞的分裂、增殖、细胞质钙聚集以及诱导血管生 成。临床应用VEGF或其基因治疗冠心病或肢体动脉闭塞性疾病已取得了 较好的效果；有人用外源性VEGF蛋白治疗大鼠脑梗死，发现神经细胞死亡 减少，脑梗死体积缩小。此外最近还有资料显示VEGF能减轻缺血一再灌 注损伤。VEGF治疗缺氧缺血性损伤，为脊髓损伤治疗提供了新的思路及 理论指导，相信其在继发性脊髓损伤治疗中有广阔的应用前景。 HT3Hl 材料与方法 实验动物及分组 键康Wistar大鼠129只，雌雄不分，体重(280±30)g，由中国医科大学 第一临床学院实验动物中心提供。根据实验目的不同而分组。第一部分 28只，随机分为7组，其中6组为实验组，1组为