《卫生微生物学》.ppt

第一节 土壤生境特性 土壤固相成份：矿物质和有机质 矿物质：微生物生长所需的常量和微量元素 有机质：微生物生长所需的碳源、氮源和能源 不同地区和种类的土壤中微生物的分布千差万别 土壤的水分 水使矿物质处于溶解状态，利于微生物利用，利于微生物分泌的酶降解有机质，使微生物处于正常生理状态。 不同类型土壤的保水性不同，不同深度土壤含水量各异，导致土壤中微生物的种类和数量的存在较大差异。 土壤的酸碱度 土壤一般呈中性或弱碱性，适于大多数微生物生长。 不同酸碱度土壤，微生物类型各异。偏酸性，真菌活动旺盛；微碱性，适合放线菌生长；中性，适合细菌生长繁殖。 土壤的温度 土壤具有保温性，利于微生物生长繁殖。 不同地区和不同季节土壤的温度不同，微生物的种类和数量也有所差异。 土壤的空气 土壤空隙中的空气是需氧微生物生长的氧气来源。 空气的多少不但影响土壤氧化还原能力，也决定了土壤中微生物的类群。空气充足，需养微生物；空气缺乏，厌氧微生物。 土壤微生物活动也是甲烷、一氧化碳、二氧化碳等温室效应气体的重要来源，参与土壤气体和大气之间的交换。 第二节 土壤微生物的来源、种类、分布及其卫生学意义 土壤表面：日照和干燥因素影响，微生物不易生存 地表5～30cm土层：微生物数量最多 深层土壤：有机物含量少、缺氧影响，微生物随着土壤深度增加而减少 土壤生物性污染：因各种原因造成土壤中致病菌、病毒、寄生虫卵等病原微生物增多。 主要来源： 未经彻底无害化处理的人畜粪便和污泥用于施肥； 未经处理的生活污水、医院污水和含病原体的工业废水进行农用灌溉； 病畜尸体处理不当。 病原微生物在土壤中的存活时间受土壤有机质种类和数量、pH、温度、日照、土著微生物的拮抗等因素影响。大部分较快死亡；部分可逐渐适应外界环境，较长时间存活下去。 病原微生物在土壤中的存活时间的长短，与病原微生物造成疾病传播的可能性有密切关系。 人--土壤--人：人体排出的病原微生物直接由施肥和污水灌溉等污染土壤，人直接接触土壤或生吃该土壤上种植的瓜果蔬菜而感染。 动物--土壤--人：有病动物排出的病原微生物污染土壤，人与污染土壤直接接触而感染发病。 土壤--人：自然土壤中存在致病菌，人与污染土壤接触而得病。 土壤微生物是参与生物地球化学物质循环和能量流动的主要成员。 在土壤修复和净化方面发挥重要作用。 外来致病微生物在疾病传播中起一定作用。土壤中隐藏大量的条件致病菌。 第三节 土壤微生物的检测与卫生标准 样品采集 样品的稀释 检验项目与检验方法 1、样品采集 根据检测目的选择有代表性的采样地点。 按对角交叉法取样（五点法）。 取样点要分布均匀，每点采样量应大致相同。 取样时，先除去地表枯枝落叶，用已灭菌的刀（铲）去除1cm左右的土壤表层，用烧灼过的勺（铲）取200-300g土样装于灭菌容器内。 标明采样地点、深度、日期。 样品采出后尽快检验。 2、样品的稀释 四分法：将5点样取出（约1-1.5kg），混合，摊成薄层分成四等份，取对角线部分土壤混合，继续四分法，最后取50-100g土壤。 研磨均匀，称取50g，加入450ml无菌自来水，混匀，静置5-10分钟，取上清作为原液。原液1ml含相当于土壤0.1g。 作10倍系列稀释。取原液10ml，加90ml灭菌水。 3、检验项目和检验方法 菌落总数的测定：常规倾注培养计数。此项检测的卫生学意义不大。 大肠菌群的检验：原液、10-1、10-2 、10-3 稀释液各1ml，分别注入装有10ml乳糖发酵管的培养基，采用发酵法进行。 根据有大肠菌群存在的阳性管数查大肠菌群最可能数表，得到每1000g土壤中大肠菌群数。 3、检验项目和检验方法 大肠菌群值：能检出一个大肠菌菌群细菌所需的最少土样量。以g表示。 大肠菌群值=1000/大肠菌群数 大肠菌群数越大，粪源污染越严重；大肠菌群值越大，土壤越干净，粪源污染越轻。 37℃，“总大肠菌群”；44.5℃，“粪大肠菌群”。 3、检验项目和检验方法 产气荚膜梭菌的检验： 土壤稀释液置80℃水浴15min，杀死繁殖体； 原液、10-1、10-2 、10-3 稀释液各1ml，加入含亚硫酸盐和铁盐的高层培养基内，震荡混匀，经冷水迅速凝固，44 ℃培养24-48h。 阳性结果：培养基出现裂痕、浑浊、变黑；黑色菌落镜检，G+粗短杆菌、芽孢位于次级端且小于菌体。 土壤粪源污染时间判断：产气荚膜梭菌多，而大肠菌群少，表示土壤并非新近污染。 3、检验项目和检验方法 土壤中致病菌和病毒的检测：数量少，检出较困难。需加大检样量、浓缩样品、选择性增菌，提高检出率。 目前我国尚未颁布土壤微生物卫生标准 必要时参考国外标准 第四节 土壤微生物污染的预防 人畜粪便、动物尸体、污水、污泥、垃圾和医院废弃物，排放前必须进行无害化处理： 化粪池、污