天然药物化学第二章糖和苷.ppt

甲基质子： ~1.0ppm 特点：比较容易辨认 用途： 1. 确定甲基五碳糖的个数 2 .确定甲基五碳糖的种类 3 .确定甲基五碳糖的位置 4 .2D-NMR谱上甲基五碳糖 信号的归属 * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 同样，甲基五碳糖中的L-鼠李糖的C2构型虽与D-葡萄糖相同，但其优势构象为1C式，2-H为平伏键，其苷键的构型亦不能用该方法判断。 对于这类糖的苷，可以利用糖苷的1-H的化学位移不同来区别。另外，用门控偶技术可以得到端基质子和端基碳的偶合常数，即1JC1-H1来区别。如吡喃糖苷的1-H是横键质子(α~苷键)时，该J值为170Hz，而1-H是竖键质子(β~苷键)时，该J值为160Hz。(见教材P89） 三、 糖的13CNMR特征 糖上碳信号可分为几类，大致范围为： 1. CH3 ~18ppm 甲基五碳糖的C6，一般有几个信号(扣除苷元中的甲基)可表示有几个甲基五碳糖存在。 2. CH2OH ~62ppm C5或C6 3. CHOH 70~85ppm 糖氧环上的C2~C4 4. -O-CH-O- 98~100ppm 端基C1或C2,，在此范围内有几个信号可视为有几种糖存在于糖链的重复单位中。 一般来说，碳原子上有α-OH的较带β-OH的，信号较在高场处。如具有C1构象的D-葡萄糖苷的端基碳信号，α-型的为97~101ppm，而β-型的为103~106ppm，便此可区别α-和β-异构体。 四、苷化位移 糖与苷元成苷后，苷元α碳、 β碳和糖的端基碳的化 学位移值均发生了改变，这种改变称为苷化位移。 1.苷化位移值和苷元的结构有关，与糖的种类无关。 2. 苷元若为链状结构，端基碳的苷化位移随着苷元为伯、 仲、叔基而递减，但对苷元的α碳和β碳的苷化位移影 响不大。 3.苷元为环醇时的苷化位移规律。 水解前后 △δ： 苷 苷元 C2 29.7 32.0 -2.3 C3 77.0 70.9 +6.1 C4 34.3 38.4 -4.1 因成苷引起的化学位移变化，专业上称之为苷化位移（glycosidation shift）。 一、研究糖链结构的一般程序 1、纯度鉴定 ▲多糖的纯度鉴定：多用比旋度法(恒定不改变)；高压电泳法（硼酸盐缓冲液PH9~12，醋酸薄膜支持，显色剂多为P-茴香胺硫酸试剂，即anisidine/H2SO4）、凝胶柱色谱法、旋光测定法。 ▲糖的衍生物苷的纯度鉴定：TLC、HPLC。 第六节：糖链的结构测定 2、分子量测定 ▲单糖、低聚糖及其苷的分子量测定：目前主要用MS法，但由于它们为多羟基化合物，普通EI-MS往往测得的最高质量峰为M-H2O，而并非分子离子峰；所以，多采用FD-MS、FAB-MS等。 ▲多糖的分子量测定：目前仍沿用经典高分子化合物分子量的测定方法，如粘度法、沉降法等，甚至仅仅测定标示其平均分子量。 3、单糖的鉴定 为了鉴定低聚糖、苷类乃至多糖分子中的单糖种类及其比例，通常是将其苷键全部水解（乙酰解），然后经TLC、PC、GC或HPLC检出。 糖类的PC常用的展开剂大多为含水的溶剂系统，如正丁醇-醋酸-水(4:1:5)，EtOAc-吡啶-水(2:1:2)等，其Rf值与溶剂的含水量有关，因此配制展开剂时必须注意，尤其对于三元组成的展开刑，其混合比例更应力求正确，并需用标准品同时点样作为对照。 和糖链结构的测定 4、单糖绝对构型的测定 确定单糖绝对构型的方法有GC法、HPLC法、手性柱色谱法、手性检测器法、旋光比较法 5、单糖间、糖与苷元间连接位置的确定 （1）苷元和糖之间连接位置的确定 以前通过分析由化学降解或酶解得到的产物来确定糖与苷元之间的连接位置，现在这种方法逐渐被NMR谱的解析所取代。 13C-NMR谱是确定苷元与糖之间连接位置的有效方法。在碳谱中，苷元羟基因与糖结合成苷，故可产生苷化位移。利用苷化位移规律，将苷和苷元的碳谱相比较，就可以很容易地辨别出苷元的哪个碳原子与糖相