罗勒组培快繁技术研究.PDF

． 702． 呻景材 JournalofChineseMedicinalMaterials 第36卷第5期2013年5月 罗勒组培快繁技术研究 邹利娟，吴庆贵，罗明华 (绵阳师范学院生命科学与技术学院，四川 绵阳621000) 摘要 目的：探索罗勒组培快速繁殖技术，为罗勒种苗工厂化生产及种质资源保存提供理论依据。方法：采用 组培技术，以罗勒种子萌发的无菌苗为外植体 ，开展丛生芽的诱导及增殖培养、壮苗培养及生根培养和移栽…系列 技术研究。结果：丛生芽的诱导及增殖适宜培养基为MS+IAA0．1mg／L+KT3．0mg／L+GA 2．0mg／L；生根最佳 培养基为 1／2MS+IAA0．3mg／L+IBA0．5mg／L，在此条件下 ，根发育良好 ，植株健壮。结论 ：建立了罗勒完整的植 株再生体系。 关键词 罗勒；茎段；快速繁殖 中图分类号：R282．2 文献标识码：A 文章编号：lO01 54(2013)05—07024)4 罗勒 OcimumbasilicumL．为唇形科罗勒属植 1．2．2 丛生芽的诱导与增殖：选择生长健壮、高 5 物，别名九层塔、金不换、兰香等，为一年生草本，全 cm 以上的无菌苗，剪取茎段接种于添加不同浓度吲 草具芳香，含精油…。罗勒具有较高的药用价值， 哚乙酸(IAA)(0、0．2mg／L)、6一苄基腺嘌呤 (6一BA) 全草入药，《中药大辞典》谓有疏风解表、行气活血、 (0、1．0、2．0、3．0mg／L)、6一糠氨基嘌呤(KT)(1．0、 强心安神、解毒消肿等功效，近年来在治疗肿瘤、血 2．0、3．0mg／L)、赤霉素3(GA)(0、1．0、2．0mg／L) 栓 、白内障及女性不孕症方面效果显著 J。目前 的MS培养基上进行培养，于4W后统计丛生芽诱 国内外相关研究主要集 中在精油等成分提取、生药 导率并继续进行增殖培养。 生理学和临床等方面，罗勒的生殖生态 、生殖物候、 1．2．3 生根培养：丛生苗长至 3．0—4．0CII1高时， 分子、细胞等方面研究甚少，组织培养方面见韩晓光 切割成单苗转入不同激素组合的MS、1／2MS培养基 等 的报道。由于野生植物资源的减少，市场需 诱导根的发生，30d后统计生根率。 求量越来越大，利用植物组织或细胞的大规模培养， 以上培养基均附加蔗糖 (30g／L)、琼脂 (9g／ 叮提取由组织和细胞产生的次生代谢产物。本研究 L)，pH5．8，于24cc条件下进行培养。 从无菌苗萌发至移栽，采用了不同激素与浓度配比， 2 结果与分析 建立了罗勒完整的植株再生体系，大大缩短 厂培养 2．1 GA 浓度对罗勒种子萌发的影响 在无菌苗 时间、提高了增殖系数、降低了成本，为罗勒种质资 萌发实验过程 中发现，罗勒种子萌发率较低。GA 源保存及规模化生产提供了科学依据。 有促进种子萌发的作用，因此在 24℃时，在添加不 1 材料和方法 同浓度 GA 的MS培养基上培养种子，可以找到罗 1．1 实验材料 购 自安徽毫州药材种子公司，经 勒种子萌发的最适 GA 浓度。表 l结果表 明，GA 本院罗明华教授鉴定为唇形科植物罗勒 Ocimumba— 对种子发芽率影响较大，在一定浓度范围内，发芽率 silicumL．的种子。 随GA，浓度升高而升高，当GA，浓度比较高时发芽 1．2 方 法 率随GA 浓度升高而呈下降趋势。GA 浓度为3．0 1．2．1 无菌苗的获得：挑选饱满的罗勒种子分别 mg／L时，发芽率最高，可达90％，实验中发现加入 用 自来水、无菌水冲洗干净备用。用 75％的酒精消 GA 培养基种子萌发时问明显短于未加入 G