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第八章
蛋白质的生物合成;中心法则;遗传信息流动示意图;蛋白质生物合成中的三大发现;蛋白质合成体系的组分; 在蛋白质合成中,tRNA 按mRNA 模板的要求将相应的氨基酸搬运到蛋白质合成的场所-----核糖体(ribosome)上,所以把核糖体称作蛋白质合成的工厂,氨基酸之间以肽键连接,生成具有一定排列顺序的蛋白质。蛋白质合成的原料是氨基酸,反应所需能量由ATP和GTP 提供.; 20种氨基酸(AA)作为原料
酶及众多蛋白因子,如IF、eIF
ATP、GTP、无机离子;mRNA;* mRNA是遗传信息的携带者;多顺反子;遗 传 密 码;mRNA及遗传密码;三联体密码的破译;以均聚物为模板指导多肽的合成;以特定的共聚物为模板指导多肽的合成;遗传密码字典;(1)连续性和方向性:两个密码子之间无任何核苷酸加以隔开和重叠,如插入/删除碱基,可发生移码突变.方向5′——3′;(2)简并性:是指大多数氨基酸都可以具有几组不同的密码子。如UUA、UUG、CUU、CUC、CUA、CUG 六组密码子都编码亮氨酸。编码同一个氨基酸的一组密码称为同义密码子。只有色氨酸和甲硫氨酸仅有一个密码子。;(3) 密码子的通用性和例外; ;二、tRNA;tRNA的二级结构示意图;tRNA的三级结构示意图; 由于密码的简并性,绝大多数氨基酸需要一种以上的tRNA作为转运工具。运输同一种氨基酸的不同tRNA称为同工受体tRNA。
蛋氨酸有两种tRNA:
tRNAfmet—只与起始密码子结合
tRNAmmet—负责把MET运到肽链中间
真核生物起始tRNA表示为:tRNAimet
用于肽链延伸的表示为:tRNAmet;被特定的氨酰-tRNA合成酶所识别。
识别mRNA链上的密码子,这是因为tRNA上有3个特定碱基组成的一个反密码子与mRNA链上的密码子配对,保证氨基酸按mRNA的碱基顺序入号。
tRNA将多肽链联结在核糖体上。; 三、 核糖体;核糖体是由rRNA(ribosomal ribonucleic asid)和多种蛋白质结合而成的一种大的核糖核蛋白颗粒,蛋白质肽键的合成就是在这种核糖体上进行的。
; 真核生物的核糖体一部分在细胞质中呈游离状态,参与细胞固有蛋白质的合成 。另一部分与内质网结合,形成粗面内质网。此外在其线粒体和叶绿体中也有核糖体。;2. 核糖体的组成;核蛋白体的组成;mRNA结合部位:
大小亚基之间存在一条细沟,用于接纳mRNA;此外,小亚基的16S rRNA可以与mRNA相互作用,从而参与mRNA与核糖体的结合。 ?;tRNA结合部位:有2个; (1)P位:即肽位(peptidyl site),或给位,在延长成肽之后,3′端连接肽链的肽酰tRNA占据的位置,肽链转位至此,延长继续。
(2)A位:即氨基酰位(aminoacyl site),或称受位,每次延长,氨基酰tRNA就加入到A位上,延长成肽中,此位因接受肽酰基链,故名受位。
;原核生物翻译过程中核蛋白体结构模式:;催化肽键形成的部位:
称为肽基转移酶,又叫转肽酶。位于大亚基上。
1992年发现该活性是由23S rRNA提供的。? ;多核糖体;四、辅助因子;第二节 蛋白质的生物合成过程;一、氨基酸的活化; 氨基酸的活化是指氨基酸与tRNA相连,形成氨酰-tRNA的过程。;AA的活化:
AA+ATP+tRNA→AA-tRNA + AMP + PPi
活化过程分两步:
氨基酸与ATP生成氨酰AMP
氨酰AMP转化为氨酰tRNA;第一步反应;氨基酸羧基通过酸酐键与AMP上的5?-磷酸基相连 ;第二步反应;氨酰-tRNA合成酶:
此酶具有较高专一性,能有效识别tRNA和相应的氨基酸。是只作用于L-氨基酸,形成氨酰-tRNA,对D-氨基酸不起作用。
此酶具有校对功能。
活化一个氨基酸消耗2分子ATP。;氨基酰tRNA的表示方法;1)识别mRNA的起始密码子为AUG,而AUG对应的氨基酸为Met。
2)有两种甲硫氨酸专一性的tRNA:
tRNAfmet—只与起始密码子结合
tRNAmmet—只与肽链内部的AUG有关
在原核生物中,多肽链起始的氨基酸均为甲酰甲硫氨酸。 ;蛋白质生物合成过程;翻译的起始
翻译的延伸
翻译的终止
;(一)起始密码子(起始信号)的识别;在核糖体小亚基内部的16SrRNA 的3ˊ-端含有一个或几个富含嘧啶碱基的序列,而在mRNA 上起始密码子AUG 的5ˊ端处大约10个核苷酸的富含嘌呤碱基的序列,这两个序列恰好有碱基互补的关系。所以有两种相互作用确定了蛋白质合成的起始部位:一是mRNA 的5ˊ端序列与16SrRNA3ˊ端序列的配对,二是mRNA上起始密码子与fMet-tRNAf的反密码子的配对。;
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