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生物技术综合实验
Comprehensive experiments of biotechnology ;1 表达蛋白质的分离沉淀;蛋白质分离;1.1 凝胶过滤层析;胶球大小-介质离子粗细影响流动;胶球大小-介质离子粗细影响流动;;二、 离子交换层析 ;;两大类离子交换介质;阳离子： 两价阳离子 NH4+ K+ Na+ H+ Li+
阴离子： I - Br - Cl - HCO3- CH3COO-, OH-??;四、 亲和层析 ;;;特异性配体亲和层析法与通用性配体亲和层析法;金属螯合亲和层析;;疏水性层析法;反相层析法;;;离子交换层析;树脂材质 ;;离子交换剂的选择 ;;? 緩衝液的選擇 ;Donnan Effect 與 pH 變化
;離子交換樹脂的前處理 ;;可用 pH 或 盐 梯度
洗脱方式有：
连续梯度 (continuous gradient) 及 阶段梯度 (stepwise gradient)。
;;;离子交换法操作要点;离子交换层析的应用;凝胶过滤层析;凝胶的分类;凝胶过滤法的应用;亲和层析;亲和层析法基质的选择; 纤维素、聚丙烯酰胺、交联葡聚糖、琼脂糖、交联琼脂糖、多孔性玻璃珠；
用在蛋白質，仍以 聚糖類 為最佳。 以 Sepharose為例，可自行用 CNBr 活化，使糖分子接上 -O-C≡N (cyanate ester) 基，再與配体上的胺基反應。
有些親和層析法使用 spacer arm 來降低配体的立体障礙
;;;影响亲和层析的因素;親和層析法的應用 ;;液相柱层析总结;介質粒子越細，色析法的 解析力 就越佳，但流動相的流速也就越慢。
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