油茶脂氢过氧化物裂解酶基因的克隆与序列分析-中南林业科技大学学报.PDF

第34 卷 第6 期 中 南 林 业 科 技 大 学 学 报 Vol. 34 No. 6 2014 年6 月 Journal of Central South University of Forestry Technology Jun. 2014 油茶脂氢过氧化物裂解酶基因的克隆与序列分析 王建勇1，2 ，谭晓风 1，2 ，龙洪旭 1，2 ，陈鸿鹏 1，2 ，刘 凯 1，2 ，朱凤云1，2 (1. 中南林业科技大学经济林培育与保护教育部重点实验室，湖南长沙4 10004； 2. 中南林业科技大学经济林育种与栽培国家林业局重点实验室，湖南长沙4 10004) 摘 要： 以油茶近成熟种子为材料，根据油茶EST 文库中已知的脂氢过氧化物裂解酶EST 序列，利用 3 ’RACE 与5 ’RACE 技术，克隆到脂氢过氧化物裂解酶的全长cDNA 序列。该基因全长 1648bp ，，包含一 个1476bp 开放阅读框长，编码491 个氨基酸，5 ’与3 ’非编码分别为52bp 、12 1bp 。预测该蛋白相对分子量为 54.7779KDa，等电点为6.77，是个叶绿体转运肽，N 端包含有22 个疏水氨基酸残基组成的序列，不仅具有转运 肽富含的丝氨酸，还含有大量转运肽中很少存在的脯氨酸。多序列比对发现油茶脂氢过氧化物裂解酶核苷酸序 列与茶的相似性达到96%，因此将该基因命名coHPL 。 关键词：油茶；脂氢过氧化物裂解酶；基因克隆；序列分析 中图分类号：S794.4 文献标志码：A 文章编号：1673-923X(2014)06-0049-06 Cloning and sequence analysis of a fatty acid hydroperoxide lyase gene from Camellia oleifera WANG Jian-yong1,2, TAN Xiao-feng1,2, LONG Hong-xu1,2, CHEN Hong-peng1,2, LIU Kai1,2, ZHU Feng-yun1,2 (1.Key Laboratory of Cultivation and Protection for Non-wood Forest trees, Central South University of Forestry and Technology, Changsha 410004, Hunan, China;2.The Key Lab of Non-Wood Forest Product of State Forestry Administration, Central South University of Forestry and Technology, Changsha 410004, Hunan, China) Abstract: A cDNA library and a of Camellia oleifera were constructed.According to the fatty acid hydroperoxide lyase EST sequences of Camellia oleifera, a specific primer was designed ，the fatty acid hydroperoxide lyase gene was cloned from Camellia oleifera ’ ’ ctively. This gene is 16 48 bp in length,including 51 bp of 5’ untranslated region and 12 1 bp of 3’ with 3 RACE and 5 RACE, respe