甲基强的松龙对深低温停循环大鼠脑保护作用的研究-小儿心胸外科专业论文.docxVIP

南京医科大学硕士学位论文甲基强的松龙对深低温停循环大鼠脑保护作用的研究 南京医科大学硕士学位论文 甲基强的松龙对深低温停循环大鼠脑保护作用的研究 中文摘要 【目的】 深低温停循环技术(DHCA)自上世纪50年代诞生以来，已广泛应用于 复杂和严重的先天性心脏病及大血管手术中，但其可能并发脑损伤的 问题尚未得到较好的解决，深低温停循环术后中枢神经系统的发病率 高达4％一25％。因此，研究DHCA脑损伤机制，及如何延长DHCA 安全时限就显得尤为重要。甲基强的松龙(NIP)具有减少炎症病灶 周围免疫细胞浸润、促进水肿的吸收等多种功效。近年来研究发现， MP具有抑制深低温停循环后脑水肿，炎症反应等脑保护作用，但其 具体作用机制尚不清楚。本研究采用新的深低温停循环大鼠脑损伤模 型，分别观察MP对深低温停循环大鼠脑组织NMDARl蛋白、 NMDARl n1】刚A以及脑含水量、组织超微结构的影响． 【方法】 第一部分深低温停循环大鼠脑保护模型的建立和评价：雄性SD大 鼠30只，随机分为3组，即颈动脉阻断深低温停循环组、颈内动脉 引流深低温停循环组和假手术组。于深低温停循环后60min时监测脑 电图变化，停循环60min后恢复循环并升温．所有大鼠于术后24h 处死，并取脑组织测脑含水量。 第二部分甲基强的松龙对深低温停循环大鼠脑NMDARl蛋白表达 的影响：采用大鼠DHCA模型。雄性SD大鼠240只，随机分为A 组(假手术组)、B组(DHCA模型组)、C组(甲强龙处理组)．A 组16只；B组和C组各112只，每组再分为DHCA后2h、6h、12h、 1d、2d、3d、7d共7个小组。观察甲强龙对DHCA60min，再灌注2h、 1 南京医科大学硕士学位论文6h、12h、ld、2d、3d及7d时脑含水量和NMDARl蛋白表达的变化。 南京医科大学硕士学位论文 6h、12h、ld、2d、3d及7d时脑含水量和NMDARl蛋白表达的变化。 第三部分甲基强的松龙对深低温停循环大鼠脑NMDARl mRNA表 达的影响：采用大鼠深低温停循环(DHCA)模型。雄性SD大鼠144 只，随机分为A组(假手术组)、B组(DHCA模型组)、C组(甲强 龙处理组)．观察DHCA60min，再灌注2h、6h、12h、ld、2d、3d 时NMDARlmRNA表达的变化以及脑组织超微结构变化。 【结果】 第一部分颈内动脉引流DHCA组大鼠仅波相对功率值明显低于颈 动脉阻断DHCA组(P0．01)，而且两组大鼠仅渡相对功率值均明显 低于假手术组(P0．01)；颈内动脉引流DHCA组大鼠0渡相对功率 值明显低于颈动脉阻断DHCA组和假手术组(P0．01)，而后两组大 鼠0波相对功率值无差异。脑含水率结果显示颈内动脉引流DHCA 组大鼠脑含水量高于颈动脉阻断DHCA组(P0．01)． 第二部分B组和C组大鼠在深低温停循环再灌注6h起出现脑水肿， 到24h水肿到达高峰，于3d后逐渐恢复至正常水平，其中c组在12h、 1d、2d水肿明显低于B组(P0．01)。免疫组化结果显示，DHCA再 灌注2h起，B组和c组大鼠NMDARl蛋白开始升高，于1d到达高 峰，后逐渐降低，于再灌注7d恢复至正常水平。c组大鼠再灌注后 2h、6h、12h、ld、2d．】5-个时间点NMDARl表达明显低于B组(P0．05)。 第三部分假手术组舯ARlmRNA呈基础水平表达．甲基强的松 龙组NMDARlmRNA表达量与模型组相比，在各时相点均显著降低 (P0．01)．脑组织超微结构观察发现甲基强的松龙能抑制DHCA脑 4 南京医科大学硕士学位论文细胞凋亡。 南京医科大学硕士学位论文 细胞凋亡。 【结论】 (1)颈内动脉引流深低温停循环模型较颈动脉阻断深低温停循环模型 脑缺血更完全，是一种更为理想的深低温停循环大鼠脑保护模型。 (2)甲基强的松龙对DHCA大鼠脑组织具有保护作用，其对NMDARI 蛋白表达的抑制作用可能是其脑保护作用的重要机制。 (3)甲基强的松龙可能通过下调Am嗄DAR l州ⅢA的过量表达，对深低 温停循环脑损伤起到保护作用。 【关键词】深低温停循环；动物模型；脑电图；脑水肿；甲基强的松 龙；脑保护；N一甲基一D一天门冬氨酸受体1；Ⅻ皿ARlIIlI矾A 南京医科大学硕士学位论文Abstract 南京医科大学硕士学位论文 Abstract Objective： The technique of deep hypothermic circulatory arrest has been widely applied in cardiac surgery after 1950s，but the temporarily or permanent neural complications wer