霍山石斛试管开花研究-植物学专业论文.docxVIP

缩略词LIST 缩略词 LIST OF ABBREVIATION ABA Abscisic acid 脱落酸 6-BA 6_benzyladenine 6一苄基嘌呤 2．4一D 2，4一Dichlorophenoxyacetic acid 2，4-2氯苯氧乙酸 DPS Data processing system 数据处理系统 EDTA Editic acid 乙二胺四乙酸 GA3 Gibberellin acid 赤霉素 h hour 小时 HPLC High performance liquid chromatograph高效液相色谱 I从 Indole一3一acetic acid 吲哚乙酸 mln mlnute 分钟 N从 a—naphthaleneacetic acid 萘乙酸 SDS Sodium dodecyl sulfate 十二烷基硫酸钠 TDZ Thidiazuron 噻苯隆 TEMED Methylethylenediamine 四甲基乙二胺 ZT Zeatin 玉米素 4 ， ， 摘要 f ＼霍山石斛(Dendrobium huoshanness)在自然条件下，从播种到开花需3年 左右。研究霍山石斛的开花过程，缩短其开花年限；在理论上或是在应用上都具 有重要意义。用组织培养方法研究诱导霍山石斛花芽发端并发育成开花植株，由厂 于试管兰花一年四季都有花蕾形成，这样有助于进一步了解花的发育过程。y 本文研究了TDZ、BA、糖浓度、低温15／5℃(日／夜)、氮含量、转瓶时间 对霍山石斛组培苗花芽发生的影响。材料为4个月苗龄的组培苗和来自于4个 月苗龄的组培苗的假鳞茎。筛选出诱导开花的适宜培养基后，定期取材(茎尖)， 进行石蜡切片，试图找出花芽分化的起始时间；使用HPLC测定植物中三种内源 激素IAA、ABA、GA3含量的变化；通过SDS．聚丙烯酰胺凝胶电泳进行蛋白组 份分析。 ， f研究发现，在改良的Ms基本培养基(I／6氮、5倍磷)，糖浓度提高到409／L， 并加入适宜浓度(0．02rag／L)的TDZ可诱导霍山石斛小苗在2~5个月开花，5 个月内统计诱导花芽发生率为50％左右。这种诱导提早开花现象，是发生在小苗 基部新萌发的幼苗。花芽顶生，在叶腋间也有花发生。低浓度TDZ诱导的花芽 多为顶生单花。高浓度TDZ诱导的花芽多为总状花序。BA诱导霍山石斛开花率 较低，而且小苗褐化严重砌￡少培养基中氮含量和低温有利于霍山石斛花芽发生。 由于所诱导的花芽正常开放率较低，尝试着将小苗在诱导花芽发生的培养基中培 养一段时间后，转移到无激素的MS培养基中，发现大多花芽能正常开放a 处理组为MS(I／6N，5P)+TDZ0．02，附加蔗糖40 g／I。，琼脂Sg／L，pH5．6-5．8。 同时设置对照组：MS，附加蔗糖30 g，L，琼脂89／L，pH5．乒5．8。通过制作石蜡 切片，观察到处理组在90天时叶腋间有花芽发生。处理组内源激素IAA含量在 90。120d明显减少，GA3与诱导花芽发生关系不明显，由于某种原因，未检测到 ABA。处理组在90～120d出现一特异蛋白。y 关键词：霍山宕新7试管弃磊TDy ABSTRACTThe ABSTRACT The time for wild Dendrobium huoshanness to flower is about 3years．Flowering is a unique developmental event in the life cycle of a higher plant．Studying D． huoshanness flower bud formation and development and decreasing the juvenile phases is important．／n vitro flowering by plantlets produced through tissue culture was studied．And in vitro flowering Was induced by many ways in the whole year．It is helpful to further our understanding of flowering regulated． The objective of this research was to study flowering may have been induced by many factors，such as TDZ，BA，sucrose，lower temperaturel5／5C，nitrogen，and time oftransferring to new medium(M