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学位论文独创性声明
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研究生签名: 时间: 年 月 日
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摘要
鸡和鹌鹑的杂交种不仅综合了双方的体型、产肉、肉质等优良性状,而且会 导致其杂交后代遗传物质的表达规律出现不同于双亲的变化;肉鸡和蛋鸡经过长 期人工选育造成了其体重和生长速度的悬殊。因而以蛋种鸡和肉种鸡与母鹌鹑进 行杂交,产生不同类型的杂交禽--蛋杂交禽和肉杂交禽,在胚胎期肌肉发育过程 中某个相关因子的差异表达可能导致肌纤维组织学特性的异同,从而造成肌肉性 状的差异。本实验以蛋用型种公鸡和肉用型种公鸡为父本,鹌鹑为母本进行杂交, 分别获得蛋杂交禽和肉杂交禽,在此基础上首先通过肌肉组织切片技术和肌纤维 直径的测量,观察比较鸡、鹌鹑、蛋杂交禽和肉杂交禽的肌纤维组织学的差异, 然后通过扫描电镜观察其肌纤维超微结构的差异,其次应用 Real-time PCR 检测 胚胎期影响肌纤维发生相关因子(MyoD、MSTN、p21、IGF-1、MLP、MyoG) 的差异表达,并结合相应时期的肌肉组织切片观察、超微结构和肌纤维直径测量, 筛选出可能对肌肉性状有重要影响的主要候选基因。具体结果如下:
(1)通过肌肉组织切片技术观察比较鸡、鹌鹑、蛋杂交禽和肉杂交禽在胚 胎期鸡肉发育的不同阶段,结果表明鸡、蛋杂交禽和肉杂交禽的肌肉发育进程比 鹌鹑大约慢两天,用目镜测微尺测量肌纤维间距发现鸡肌纤维间距肉杂交禽 蛋杂交禽鹌鹑。
(2)肌纤维直径的测量结果显示:鸡肌纤维直径肉杂交禽蛋杂交禽鹌 鹑,每个类群间存在极显著差异(P0.01);同时肌纤维直径随着胚胎的发育而 增粗。
(3)MyoD、MSTN 和 MLP 基因在四个类群中存在差异表达,推测 MyoD、 MSTN 和 MLP 可能是造成肌肉性状差异的主要候选基因。
(4)通过超微结构观察发现鹌鹑第 17 天可以明显观察到肌节,其他三个类 群观察不到;但由于单束肌纤维外包裹有肌膜、肌内膜、肌束膜和肌外膜,对肌 纤维超微结构的观察造成了影响,应用 SEM 观察胚胎期肌肉发育过程中肌纤维 的超微结构有待进一步研究。
(5)MyoG 基因在肉杂交禽和蛋杂交禽中比鸡和鹌鹑提前 2 天高表达,为 进一步验证 MyoG 基因可能是导致杂交禽胚胎后期出现死亡高峰的一个重要原 因提供理论依据。
关键词:鸡;鹌鹑;杂交禽;肌肉发育;肌纤维发生相关因子;肌肉组织切片;
SEM;实时荧光定量 PCR
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Abstract
The interspecific hybridization of Chicken (♂) and Quail (♀) has not only integrated the two species of the body type, meat production, meat quality and other good traits, but also resulted in the expression pattern of their offsprings genetic material is different from the parents. However, due to long-term artificial selection, broiler and layer have serious disparity of their body weight and growth rate. Meat-breeding cocks and egg-breeding cocks were used as male parents, and quails as female parents for cross-fertilizing, we could obtain two stains hybrid—meat-hybrid and egg-hybrid, differentially expression of a relevant factor in embryonic myogene
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