课件：第章食品中化学物质的生殖发育毒性和致畸作用及评价.ppt

一项统计显示，目前，我国有育龄夫妇约2.3亿人，其中有近1000万不孕不育症患者，而且每年以数十万的速度递增。也就是说，我国每10对育龄夫妇中就有1对遭遇生育问题，比30年前翻了10倍多！ 自发流产率可达全部妊娠中的50%。 着床后的自发流产率为32%～34%。 2008年，解放军174医院生殖中心调查显示，四成男性精子数量、质量不正常。 我国人口和计划生育委员会科学技术研究所，整理分析了北京、上海等39个市、县的数据，结果显示，近25年来，我国男性的精液质量正以每年1%的速度下降，精子数量降幅达40%以上；且工业化程度越高，该地区的精子质量降低越明显。 精子质量降低已经有低龄化的趋势。2009年，武汉一家计生研究所曾经在高校公开征精，但意外的是，前来捐精的400名大学生志愿者，精子合格的不到50人。 2004年，全国人大代表钟南山院士在广州分组讨论会上说：“食品安全日趋严重，50年后广东的大多数人将丧失生育能力。” 生育危机，随科技进步和化学革命已经降临到人类头上的。食品安全已成为破坏男女生育能力的祸首。 对于直接和间接用于食品的化学物质进行安全性评价是一项极为重要的任务。 1．精子的形成 精原细胞(休止状态) 2n 有丝分裂(青春期) 初级精母细胞 2n 减数分裂 次级精母细胞 n 精细胞 n 精细胞转变成成熟精子 精子生成或精子发生 人：72-90天 小鼠：35天 大鼠：48天 兔：43天 二、雄性生殖毒性评价 2．毒物对雄性生殖的影响 对睾丸生精细胞的影响 精子生成障碍、引起生殖细胞突变。 对内分泌功能的影响 睾丸间质细胞功能异常，有关激素合成或作用 发生改变。 3．雄性生殖毒性的检测方法 （1）精子生成分析 精子计数 精子形态观测 精子状态分析试验 （2）精子穿透试验 检测精子在体外能否成功穿透去透明带的金黄地鼠卵子而受精的试验。 （3）体外试验 睾丸支持细胞和间质细胞的分离培养。 （4）睾丸中标志酶活性的测定 指标：乳酸脱氢酶X、山梨醇脱氢酶、6-磷酸葡萄糖脱氢酶； （5）雄性激素检测 指标：促性腺激素、黄体生成素、雄激素的含量 － － － － － ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ － － － － － ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ 正常细胞电泳图 受损细胞电泳图 （6）雄性生殖细胞的遗传毒性试验 ——单细胞凝胶电泳试验（彗星试验） （7）病理学检查 大体检查：睾丸、附睾、前列腺及精囊的重量和形态； 病理组织学检查 L：隐睾鼠的睾丸和附睾 R：正常鼠的睾丸和附睾 A ：正常雄性仔鼠的睾丸和附睾; B ：尿道下裂仔鼠的睾丸和附睾。 (×200） 三、雌性生殖毒性评价 1．雌性生殖细胞的生成过程 卵原细胞(休止状态) 2n 有丝分裂(青春期) 初级卵母细胞 2n 减数分裂 次级卵母细胞 n 减数分裂 卵细胞 n 成熟卵子 2．毒物对雌性生殖系统的影响 对卵细胞的影响 卵母细胞数减少或突变 对内分泌功能的影响 影响受精、着床、胚胎发育、分娩等 其它毒性作用 如对子代造成畸形、死胎、功能发育不全等。 生精细胞 3．雌性生殖毒性的检测方法 雌性生殖毒性的检测方法 动物试验 体外试验 其他辅助试验 繁殖毒性试验 和致畸试验 三段生殖试验 妊娠前期及初期 器官形成期 围产期及授乳期 四、生殖毒性的评价 繁殖毒性试验 作用：全面反映外源化学物对性腺功能、交配行为、受孕、妊娠过程、分娩、授乳以及幼仔断乳后生长发育可能发生的影响。 1．繁殖毒性试验设计 动物选择：多用性成熟大鼠， 雌雄比例1:1或2:1。 染毒：接触受试物的方式可混入饲料或饮水中，由动物摄取，也可采用灌胃或腹腔注射。 剂量分组：设三个剂量组，以及一个空白和溶剂对照组。 高剂量组：以超过人类实际接触水平，能使新一代动物出现轻度中毒，死亡率不超过10%，不完全丧失生育能力。 低剂量组：新代动物仅能出现轻微的中毒症状。 中间剂量组：介于高剂量和低剂量之间的剂量。 三代两窝生殖试验 两代一窝生殖试验 一代一窝生殖试验 F３b F３a F１b F２b F２a F１a F０ （断奶或出生８周） 给予受试物８到１２周 观察三个月，喂饲普通饲料，观察其生长发育情况 断乳后给予受试物８到１２周 观察三个月，喂饲普通饲料，观察其生长发育情况 断乳后给予受试物８到１２周 多代生殖毒性研究不仅能够检测受试物对成年动物生殖毒性的影响，还能检测外源化学物对子