火针对实验性大鼠类风湿关节炎的治疗作用的研究-针灸推拿学专业论文.docxVIP

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  • 2019-05-03 发布于上海
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火针对实验性大鼠类风湿关节炎的治疗作用的研究-针灸推拿学专业论文.docx

组、模型组、火针组、每组各 10 只。观察正常组、模型组、火针组治疗前后的 类风湿因子(RF)、抗-CCP 抗体及滑膜组织病理改变的变化。 结果:(1)火针组可有效缓解炎症关节的肿胀程度;(2)正常组滑膜组织病理切 片无充血水肿,无滑膜增生,无炎细胞浸润;模型组滑膜组织充血、水肿明显, 有大量的炎细胞浸润,滑膜细胞增生,滑膜层数增加;火针组滑膜组织轻微充血 水肿、少量炎细胞浸润,滑膜层数减少;(3)组间比较:与正常组比较,模型组、 火针组抗—CCP 抗体及 RF 含量明显增高,有统计学意义(P0.05),与模型组比 较,火针组抗—CCP 含量及 RF 含量较模型组低,有统计学意义(P0.05)。 结论:火针对实验性类风湿关节炎大鼠疗效显著。 关键词:类风湿性关节炎 火针 大鼠 前言 类风湿关节炎(Rheumatoid arthritis, RA)是一种以周围关节骨质损害为 特征的全身性自身免疫性疾病[1],除关节损害外,心、肺、神经系统等器官或组 织也可受累。本病任何年龄均可发病,但好发于 35-50 岁,女性患者多见。60%-70% 患者以缓慢、隐袭方式发病,初发病时可能一、二个小关节受累,以后逐步发展 成对称性关节炎。受累关节以腕关节、掌指关节和近端指间关节最常见,其次为 足、膝、踝、肘、肩、颈、颞颌以及髋关节。关节表现以晨僵、疼痛、肿胀、关 节畸形以及关节功能障碍为表现。本病是造成社会劳动力丧失的主要疾病之一[2], 我国患病率约为 0.32%-0.36%[3],农村高于城市,汉族的患病率明显高于其他民 族;按此粗略计算,我国大约有 360 万-600 万病人。从总体上看,我国类风湿 关节炎的病情进展较西方国家为轻,但其对劳动力的损伤或造成关节严重功能障 碍,以及残废的情况仍不容忽视。 目前比较公认的西医治疗方法多采用甲氨碟吟等免疫抑制剂抑制免疫反应、 抗炎,但不良反应的发生率却较高, 如消化道出血、肝功能及肾功能的损害、过 敏反应等, 又限制了西医治疗方法的应用。 采用针灸治疗类风湿性关节炎同样能取得较好的疗效。针灸治疗类风湿性关 节炎具有疗效肯定,副作用小,经济实惠的优点,受到医患的青睐。导师通过多年 的临床经验发现火针对类风湿的疗效明显,故本课题通过火针对类风湿关节炎大 鼠的疗效,探讨火针治疗类风湿关节炎的机理。 材料与方法 1.材料 1.1 实验动物:采用30只清洁级健康SD大鼠,雌雄各半,体重200±20g。由贵阳 医学院实验动物中心提供。用固定配方标准饲料喂(贵阳医学院实验动物中心提 供),造模前在相同条件下适应性喂养一周,在同一环境室温下,自由进食。 1.2 主要试剂:完全弗氏佐剂(Sigma 公司提供),抗-CCP 抗体试剂盒(北京永 辉),RF 测定试剂盒(南京建成)。 1.3 华佗牌针灸针、酒精灯等。 2.方法 2.1 分组及造模 动物造模前在相同光照条件适应性喂养1周后,用5%水合氯醛(0.8mL/100g)腹 腔麻醉,雌雄各半,随机抽取10只作为正常对照组,于左后足跖底部碘伏消毒后 取3个点,用微量注射器皮内注射0.15ml生理盐水,余40只,用1ml注射器皮下注 射0.15ml弗氏完全佐剂[11]。观察3d,以24h出现注射局部急性炎性反应,红、 肿、皮温升高,48h出现继发性全身多发性关节炎,表现为前肢或对侧肢体严重 时耳、红尾部肿或炎性结节出现,说明模型复制成功. 2.2正常组:不造模,不治疗;模型组:只造模,不治疗;火针治疗组:造模后 12 h选择踝关节肿胀最高点,先用75%酒精棉球消毒,再用碘伏棉棒在穴位处标 示0.4 mm大小色斑,选用22-28号不锈钢针,针柄用布包裹,以不导热为宜。将 针在酒精灯上烧红,左手固定大鼠肿胀的脚,右手持针。迅速刺入患部,然后立 即将针拔出,以污血出尽为度,每只脚针刺3针。每周针刺1次。 2.3 检测项目及方法:以上各组,治疗 21 天后,每只大鼠取相应检测指标后断 颈处死。 2.3.1.一般情况:造模及火针治疗前后观察大鼠体毛色泽,神志,四肢活动,饮 食变化。 2.3.2 末次治疗后24小时,麻醉,取血检测血清中RF、抗-CCP抗体,均严格按照 ELISA试剂盒说明书进行。 2.3.3 组织形态学观察:采集血样后,断颈法处死大鼠,摘取大鼠跖趾关节,10% 甲醛固定液中固定、脱钙、包埋、切片、HE染色,观察组织形态学(跖趾关节上滑 膜细胞的厚度及结构等)改变。 2.4 数据处理及统计分析 计量资料以均数±标准差(x±s)表示,各组间差异采用方差分析(One- way ANOVA),两组间均数比较用 t 检验,采用 SPSS(13.0 版)统计软件进行统计。 结 果 1.造模及火针治疗前后大鼠体毛色泽,神志,四肢活动,饮食情况见下表;正常 组优于火针组,火

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