脊髓水平TRPM8激活参与疼痛-瘙痒共病的研究-麻醉学专业论文.docxVIP

缩略词表（abbreviations）英文缩写英文名中文名TRPM8transient receptor potential melastatin 8瞬 时 感 受 器 电位 melastatin 8SNIspared nerve injury选择性神经分支损伤TRPtransient receptor potential瞬势感受器电位TRPV1transient receptor potential vanilloid subfamily member 1瞬时受体电位香草酸 亚家族成员 1TRPA1transient receptor potential A1瞬势感受器电位 A1PWLPaw withdrawal latency缩爪潜伏期MWTMechanical withdrawal threshold机械缩爪阈值DRGDorsal root ganglion背根神经节CQchloroquine氯喹MrgprA3ischemia postconditioning缺血后处理GRPGastrin Releasing Peptide胃泌素释放肽GRPRGastrin Releasing Peptide Receptor胃泌素释放肽受体GPCRsG-Protein Coupled ReceptorsG 蛋白偶联受体HRPhorseradish peroxidase辣根过氧化酶ECLenhanced chemiluminescence增强化学发光DMSOdimethylsulfoxide二甲基亚砜PBSphosphate buffer saline磷酸盐缓冲液PVDFpolyvinylidene fluoride氟化聚偏乙烯KMKunming昆明小鼠SDSSodium dodecyl sulphate-polyacrylamide gel electrophoresis十二烷基磺酸钠聚丙 烯酰胺凝胶电泳PMSFphenylmethylsulfonyl fluoride苯甲基磺酰氟TEMEDN’N’N’N’-tetramethylethylenediamine四甲基乙二胺EDTAethylenediaminetetra-acetic acid乙二胺四乙酸Trishydroxymethyl-aminomethane三甲羟基氨基甲烷APAcr Bisammonium persulfate acrylamidebisacrylamide过硫酸铵丙烯酰胺 甲叉双丙烯酰胺SDS PAGEdsoddiium dodecylsulfate polyacrylamide gel electrophoresisday十二烷基硫酸钠 聚丙烯酰胺凝胶电泳天mingminutegram分钟克脊髓水平 TRPM8 激活参与瘙痒-疼痛共病的研究摘 要目 的 TRPM8是一种属于TRP（transient receptor potential ） 瞬时受体电位 蛋白家族的温度觉非选择性阳离子通道，具有较高的Ca+通透性，薄荷醇、Iclin 是其高效激动剂，也可以被冷刺激（8-28℃）、PIP2等激活，研究表明，在CCI神 经病理性疼痛动物模型中神经损伤同侧背根神经节（DRG）TRPM8的蛋白表达显著 增多，与冷痛觉敏化变化一致， TRPM8参与神经病理性疼痛痛觉敏化的形成与维 持。已经证实，降低皮肤温度及外用薄荷醇可以减轻皮肤瘙痒临床症状，同时有 学者报道薄荷醇及Iclin可缓解实验性或疾病相关的瘙痒，提示TRPM8可能有中枢 性抗瘙痒作用。本研究旨在评估神经病理性疼痛是否抑制瘙痒神经信号传导减少 搔抓行发作，并探讨TRPM8在其中的作用。方 法 KM 雄性小鼠, 20-30g,实验采用坐骨神经分支选择性损伤的方法制备神经病理性痛模型（SNI）和氯喹（CQ）皮下注射诱导瘙痒模型。第一阶段观察 SNI 病理性疼痛对瘙痒影响及建立疼痛瘙痒共病模型，分为 6 组：神经病理性疼痛组（SNI）、假手术组（Sham）、瘙痒组（CQ）、瘙痒溶媒组（NS）、疼痛瘙痒共病组（SQ） 及空白对照组（CON）。SNI 组及 SQ 组通过暴露分离小鼠左侧坐骨神经和其 3 个末 端分支：腓肠神经、腓总神经和胫神经，结扎并切断腓总神经和胫神经，建立神 经病理性疼痛模型， Sham 组只暴露分离神经不进行损伤神经操作。CQ 予以小鼠 颈背部皮下注射 200ug/50ul 氯喹。SQ 组是建立 SNI 疼痛模型后第五日颈背部注 射等剂量容积的氯喹。NS 组在小鼠颈背部皮下注射 50ul 生理盐水对照。CON 组是 不进行任何操作。第二阶段分为疼痛瘙痒共病模型+AMTB（SQ-A）组和疼痛瘙痒共 病模型+AMTB 溶媒对照组（SQ-V）。-A 组行腰段鞘内注射 TRPM8 特异性阻断剂 AMTB