《DNA重组技术的基本工具》课件解读.pptVIP

《DNA重组技术的基本工具》课件解读.ppt

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通过合理的状态检修设备实现对电力设备的在线检测的方法,可以帮助企业最快了解电力设备的实际运行状态,并准确掌握设备的运行参数或者线路的标准状态 基因工程 专题1 每100kg 猪或牛的胰腺中仅可提取4~5g。   1979年,美国将人的胰岛素基因重组到大肠杆菌内,实现了细菌生产胰岛素,大大降低了生产成本。 治疗糖尿病特效药—— 据WTO调查: 2005年全世界约有糖尿病患者1.8亿人,我国约6000万。 胰岛素 思考:转基因技术实现了一种生物的某些性状 在另一种生物中表达。这些性状的表达与我们学过的基因的什么过程有关? 密码子在生物界是   的! DNA(基因)   mRNA 蛋白质(性状) 转录 翻译 共用 基因工程的产物 基因工程的概念 基因工程是指按照人们的愿望,进行严格的设计,通过 和 ,赋予生物以 ,创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。 基因工程是在 水平上进行设计和 施工的,又叫做 技术。 定向地改造生物的遗传特性。 转基因技术 体外DNA重组 DNA分子 DNA重组 新的遗传特性 基因工程的概念 基因工程的别名 操作环境 操作对象 操作水平 基本过程 DNA重组技术 生物体外 基因 DNA分子水平 剪切 → 拼接 → 导入 → 表达 问题探讨:    苏云金芽孢杆菌含有一种可以合成毒蛋白的基因。    让细菌的毒蛋白基因在棉花细胞中表达,可培育出抵抗棉铃虫害的抗虫棉。 想一想需要做哪些关键工作? 苏云金芽孢杆菌 毒蛋白 普通棉花  抗虫棉 基因工程培育抗虫棉的关键步骤: 关键步骤一: 抗虫基因从苏云金芽孢杆菌细胞内提取出来 关键步骤二: 抗虫基因与棉花DNA“缝合” 关键步骤三: 抗虫基因进入棉花细胞 一、DNA重组技术的基本工具 解决培育抗虫棉的关键步骤需要哪些工具? “分子手术刀”—— 限制性核酸内切酶 关键步骤一: 抗虫基因从苏云金芽孢杆菌细胞内提取出来 关键步骤二: 抗虫基因与棉花DNA“缝合” 关键步骤三: 抗虫基因进入棉花细胞 “分子缝合针”—— DNA连接酶 “分子运输车”—— 基因进入受体细胞的载体 1.1、DNA重组技术的基本工具 思考: ⒈自然界是否存在一种生物的DNA进入另一生物的情况? 2.单细胞生物并没有在进化 中灭绝,有何保护机制?   可能产生了一些特殊的酶来防范。可而这种酶能识别外来侵入的DNA并将其分解,而对自身的DNA不能起作用。 “分子手术刀”——限制性核酸内切酶 1.“分子手术刀”——限制酶 (1)来源:主要是从 中分离纯化出来的。 (2)功能: ①能够识别双链DNA分子的某种特定的 , ②并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的 断开. (切割部位一般都具有反向重复序列) 因此具有专一性(特异性)。 (3)结果:经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式: 和 。 原核生物 核苷酸序列 磷酸二酯键 黏性末端 平末端 思考与探究 P7 (2) 1、细菌中含有某种限制酶的细胞,其DNA分子中不具备这种限制酶的识别切割序列; 2:通过甲基化酶将甲基转移到所识别序列的碱基上,使限制酶不能将其切开。 为什么限制酶不剪切细菌本身的DNA? T 磷酸二酯键 1 2 3 4 5 1 2 3 4 5 A Go back 限制酶 DNA解旋酶 区别 限制性内切酶与解旋酶的区别 切割特定的核苷酸序列的磷酸二酯键 将DNA两条链的氢键打开形成两条单链 限制酶的识别序列: 能被限制酶特异性识别的切割部位都具有回文序列:在切割部位,一条链正向读的碱基顺序与另一条链反向读的顺序完全一致。 限制酶所识别的序列,无论是6个碱基还是4个碱基,都可以找到一条中轴线(如图),中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向对称、重复排列的。 想一想限制酶所识别的序列有什么特点?   EcoRⅠ 黏性末端     黏性末端   EcoRⅠ 黏性末端     黏性末端 什么叫黏性末端? 被限制酶切开的DNA两条单链的切口,带有几个伸出的核苷酸,它们之间正好互补配对,这样的切口叫黏性末端。 SmaⅠ 平末端   平末端 要想获得某个特定性状的基因必须要用限制酶切几个切口?可产生几个黏性(平)末端?

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