黄酮落新妇苷对胰脂肪酶抑制作用研究-食品与发酵工业.PDF

食品与发酵工业 ＦＯＯＤＡＮＤＦＥＲＭＥＮＴＡＴＩＯＮＩＮＤＵＳＴＲＩＥＳ ＤＯＩ：１０．１３９９５／ｊ．ｃｎｋｉ．１１－１８０２／ｔｓ．０１５８３９ 引用格式：郑丹，张清峰．黄酮“落新妇苷”对胰脂肪酶抑制作用研究［Ｊ］．食品与发酵工业，２０１８，４４（２）：１７２－１７５；１８１． ＺＨＥＮＧＤａｎ，ＺＨＡＮＧＱｉｎｇｆｅｎｇ．Ｔｈｅｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇｅｆｆｅｃｔｏｆｆｌａｖｏｎｏｉｄ“ａｓｔｉｌｂｉｎ”ｏｎｐａｎｃｒｅａｔｉｃｌｉｐａｓｅ［Ｊ］．ＦｏｏｄａｎｄＦｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎＩｎｄｕｓｔｒｉｅｓ，２０１８，４４ （２）：１７２－１７５；１８１． 黄酮“落新妇苷”对胰脂肪酶抑制作用研究 郑丹，张清峰 （江西农业大学 食品科学与工程学院，江西省天然产物与功能食品重点实验室，江西 南昌，３３００４５） 摘　要　通过研究落新妇苷对胰脂肪酶的抑制活性，进一步探索其调节脂肪代谢的可能原因。结果表明，落新 妇苷对胰脂肪酶有一定的抑制作用，半抑制率浓度为 １０５ ｍｏｌ／Ｌ，最大抑制率为５６．３％；且抑制效果随二者作 μ 用时间延长而增强。酶动力学特征研究表明，落新妇苷是胰脂肪酶非竞争性抑制剂，不改变其与底物的亲和程 度，但使最大反应速度减小。荧光光谱滴定法表明落新妇苷会使胰脂肪酶内源荧光淬灭，并使其最大发射波长 红移，二者结合常数ｌｇＫ 为５．５０，结合位点数ｎ为１．１７。 ａ 关键词　落新妇苷；胰脂肪酶；抑制作用 　　以甘油三酯为主的食物脂肪摄入后，须通过胰和 晶纯生化科技股份有限公司；４硝基苯棕榈酸酯 胃脂肪酶水解成单酰甘油和游离的脂肪酸后才能被 （ＰＮＰＰ），上海晶纯生化科技股份有限公司；４硝基苯 吸收。脂肪酶抑制剂通过抑制胰和胃脂肪酶活性，可 酚（ＰＮＰ），上海展云化工有限公司；阿拉伯树胶，上海 以减少膳食中脂肪的吸收，并通过粪便直接排泄，从 青析化工科技有限公司；脱氧胆酸钠，上海晶纯生化 而达到控制和治疗肥胖的目的。脂肪酶抑制剂因不 科技股份有限公司；ＴｒｉｓＨＣｌ，北京索莱宝科技有限公 影响食欲和人体神经系统，已被证实有较高安全性。 司。其他所用试剂均为分析纯。 因此，从天然植物中寻找安全有效的脂肪酶抑制剂成 １．２　试验主要仪器 为预防和治疗的肥胖热点问题［１－２］。研究表明许多 ＨＨ６数显恒温搅拌循环水箱，常州国华电器有 黄酮单体或富含黄酮的植物提取物有脂肪酶抑制 限公司；５６００型可见分光光度计，江苏晶禾科仪厂； 活性［２－４］。 ９７０ＣＲＴ型荧光分光光度计，上海精密科学仪器有限 落新妇苷是一种广泛存在于植物及其加工食品 公司。 中的功能性黄酮成分，如土茯苓［５］ ［６］ １．３　试验方法 、龟苓膏 、葡萄 ［７］ ［８］ １．３．１　主要试剂的配制 （葡萄酒） 、罗汉茶 等。我们前期研究发现给高 脂小鼠喂食土茯苓总黄酮及落新妇苷单体可显著减 配制５０ｍｍｏｌ／ＬｐＨ８．０的Ｔｒｉｓ缓冲液，并加入 少小鼠体重增幅、腹腔脂肪重量、血清中甘油三酯含 ０．１％阿拉伯树胶粉和０．２％ 脱氧胆酸钠。用Ｔｒｉｓ缓 ［９］ 冲液配制 １．２ｍｇ／ｍＬ的胰脂肪酶溶液，混匀后 ５０００ 量 。本文通过研究落新妇苷对胰脂肪酶的抑制活 性，进一步解释其可能的作用原因。 ｒ／ｍｉｎ离心取上清液。精确称取２２．５ｍｇ落新妇苷用 ６０％乙醇溶解至５ｍＬ，再取