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宁夏医科大学学位论文独创性声明
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年 月 日 年 月 日
宁夏医科大学硕士研究生
宁夏医科大学硕士研究生学位论文
中文摘要
I
I
黄芪注射液和黄芪甲苷对大鼠脑出血后出血灶周围
神经元凋亡的作用研究
摘 要
目的 观察黄芪注射液和黄芪甲苷对大鼠脑出血后出血灶周围神经元凋亡的作用, 探讨脑出血后神经元凋亡的规律及可能的凋亡通路,以期为黄芪注射液以及黄芪甲苷应 用于临床脑出血的治疗提供理论依据和实验依据。
方法 清洁级健康成年 SD 大鼠 140 只,雌雄不限,体重 300±50 g。大鼠随机分为 正常组(n=20)、模型组(n=40)和治疗组(n=80)。模型组分为 3 d 模型组(n=20)和 7 d 模型组(n=20);治疗组分为黄芪注射液 3 d 治疗组(n=20)、黄芪注射液 7 d 治疗组
(n=20)、黄芪甲苷 3 d 治疗组(n=20)、黄芪甲苷 7 d 治疗组(n=20)。应用脑立体定位 仪于大鼠尾壳核注入肝素化 VII 型胶原酶建立脑出血模型。治疗组大鼠于脑出血模型制 作成功后 6 h 开始腹腔注射黄芪注射液或黄芪甲苷进行干预,继之每隔 24 h 注射一次。 模型组每日经腹腔注入相应量的生理盐水。分别对各组大鼠进行神经行为学评分,尼氏 染色,吉姆萨(Giemsa)染色,免疫组织化学染色,脑组织含水量测定及蛋白免疫印迹
(Western Blot)等实验观察。
结果 ① 大鼠神经行为学评分:黄芪注射液治疗组和黄芪甲苷治疗组均能有效降 低脑出血大鼠的神经功能缺损评分(P0.05);黄芪注射液和黄芪甲苷治疗脑出血大鼠 7 d 时其神经行为学改善情况要优于相应的 3 d 治疗组(P0.05)。② 大鼠脑出血后脑组 织含水量:大鼠脑出血后各模型组脑组织含水量较正常组明显增加(P0.05);黄芪注 射液及黄芪甲苷各时间段治疗组大鼠脑组织含水量与其相应的模型组比较均明显减小
(P0.05);黄芪注射液各治疗组大鼠脑组织含水量与黄芪甲苷治疗组比较均明显减小
(P0.05);7 d 黄芪注射液治疗组及 7 d 黄芪甲苷治疗组大鼠脑组织含水量与各自的 3 d 治疗组比较均明显减小(P0.05);黄芪注射液 7 d 治疗组大鼠脑含水量已接近正常大鼠 脑组织含水量。③ 大鼠脑组织尼氏染色:正常神经元尼氏体较大、数量较多、染色较
II
II
深,病变轻的神经元尼氏体变小、数量变少、染色浅淡,病变较重的神经元尼氏体数量
更少。④ 大鼠脑组织 Giemsa 染色:各治疗组脑出血灶周围神经元凋亡数量及程度均较 模型组降低。⑤ 大鼠脑组织免疫组化染色:Bcl-2、Bax 及 Caspase-3 在正常脑组织中仅 有少量表达,并且 Bcl-2/ Bax 的值接近于 1。与相应模型组比较,各药物治疗组 Bcl-2 的阳性表达均明显升高(P0.05),而 Bax 及 Caspase-3 的阳性表达均显著降低(P0.05)。 与 3 d 黄芪甲苷治疗组相比,3 d 黄芪注射液治疗组 Bcl-2 的阳性表达明显升高(P0.05), Bax 及 Caspase-3 的阳性表达明显降低(P0.05)。与 7 d 黄芪甲苷治疗组相比,7 d 黄芪 注射液治疗组 Bcl-2 的阳性表达明显升高(P0.05),Bax 及 Caspase-3 的阳性表达明显 降低(P0.05)。与 3 d 黄芪注射液治疗组相比,7 d 黄芪注射液治疗组 Bcl-2 的阳性表 达明显升高(P0.05),Bax 及 Caspase-3 的阳性表达明显降低(P0.05)。与 3 d 黄芪甲 苷治疗组相比,7 d 黄芪甲苷治疗组 Bcl-2 的阳性表达明显升高(P0.05),Bax 及 Caspase-3 的阳性表达明显降低(P0.05)。⑥ 大鼠脑组织蛋白免疫印迹:正常组大鼠脑组织内
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