黄瓜短链脱氢酶SDR110C家族的生物信息学分析及CsSDR110C14的遗传转化分析-蔬菜学专业毕业论文.docxVIP

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2019-05-11 发布于上海
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黄瓜短链脱氢酶SDR110C家族的生物信息学分析及CsSDR110C14的遗传转化分析-蔬菜学专业毕业论文.docx

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缩略词对照表英文缩写缩略词对照表英文缩写英文名称中文名称 OD PCR Optical Density Polymerase Chain Reaction 光密度聚合酶链式反应 Rif RNA Rifampicin Ribonucleic Acid 利福平核糖核酸 RNAi RNA interference RNA 干扰 RNase Ribonuclease 核糖核酸酶 RT-PCR Semi-quantitative reverse transcription-PCR 半定量反转录 PCR WT Wild Type 野生型 YNB Yeast nitrogen base 酵母氮源 YPDA Yeastex回ct peptone dextrose adenine sulfate 酵母浸出粉陈葡萄糖腺嚓岭 medium 硫酸盐培养基目录中文摘要目录中文摘要．I Abstract ．II 1引言 l 1．1研究目的及意义。1 1．2国内外研究进展．．2 1．2．1黄瓜表皮毛研究进展 2 1．2．2植物短链脱氢酶超家族的分类与命名 3 1．2．3短链脱氢酶超家族基因在植物的初级代谢和次级代谢中的功能 4 1．2．4生物信息分析 7 1．2．5反向遗传学研究 7 1．3研究内容和技术路线。8 1．3．1研究内容 8 1．3．2技术路线 8 2材料与方法 10 2．1试验材料 1 0 2．1．1植物材料．10 2．1．2菌株及质粒 10 2．1．3酶及生化制剂 10 2．1．4 PCR引物．1 1 2．1．5组织培养培养基．1 1 2．2试验方法 1 1 2．2．1半定量PCR检验无毛与‘大青把’差异表达基因 11 ‘2．2．2 CsSDRll0C14(CsalMl68880)的克隆 13 2．2．3 CsSDRll0C14(CsalMl68880)的载体构建 17 2．2．4黄瓜的遗传转化及转基因植株的PCR验证 20 2．2．5组织表达特异性分析．21 3结果与分析．．24 3．1验证CsalMl68880无毛突变体及其亲本‘大青把’叶片中的表达差异 24 3．2黄瓜CsalMl68880所在短链脱氢酶SDRl 10C家族基因功能预测 24 3．2．1黄瓜SDRl 3．2．1黄瓜SDRl 10C家族基因的鉴定 24 3．2．2黄瓜SDRl 10C家族基因的染色体定位 25 3．2．3黄瓜SDRl 10C家族基因和蛋白质序列结构 26 3．2．4 SDRl 10C家族基因的物种进化关系 29 3．3黄瓜SDRl 10C家族基因在黄瓜生长发育过程中的组织表达模式。31 3．3．1黄瓜SDRll0C家族基因在黄瓜不同组织中的表达特异性 31 3．3．2黄瓜SDRl IOC家族基因在黄瓜幼苗脱黄化阶段的表达特性 33 3．4构建CsSDRll0C14(CsalMl68880)基因表达载体及黄瓜遗传转化．35 3．4．1黄瓜CsSDRll0C14基因过表达载体和RNAi沉默表达载体的构建 35 3．4．2黄瓜遗传转化试验．36 3．5酵母单杂交筛选调控CsSDRIlOCl4(CsalMl68880)基因表达的转录因子 37 3．5．1黄瓜CsSDRll0C14基因启动子酵母单杂交筛选载体的构建 37 3．5．2酵母单杂交筛选黄瓜质粒文库．37 4讨论．．39 4．1黄瓜无毛突变体与其亲本中CsalMl68880基因差异表达分析 39 4．2黄瓜CsalMl68880所在短链脱氢酶SDRl IOC家族的生物信息学分析 39 4．3 SDRl 10C基因家族的物种进化分析 40 4．4黄瓜SDRl 10C家族基因的光诱导表达分析．．40 4．5 CsSDRll0C14(CsalMl68880)基因功能分析 41 5结论．．42 6参考文献 43 7附录。51 8致谢。53 9攻读硕士学位期间发表的论文．．．． 54 山东农业大学硕士学位论文中文摘要山东农业大学硕士学位论文中文摘要黄瓜(Cucumis sativus L．)是我国重要的设施栽培蔬菜。果实刺瘤是黄瓜重要的外观性状。黄瓜果刺与表皮毛有着共同的形态特征及遗传基础，因此，对黄瓜表皮毛的研究也有助于人们了解黄瓜果刺的发育机理。黄瓜无毛突变体(glabrousl，gtJ)是在华北型黄瓜品种(‘大青把’)中发现的自然突变体。为了研究表皮毛形成关键基因 Gll所参与的基因调控网络，本研究分析了无毛突变体与其亲本‘大青把’的基因表达谱。在差异表达的基因中，短链脱氢酶基因CsalMl68880是一个在无毛突变体中表达量显著上升的基因之一。生物信息学分析表明，CsalMl68880属于短链脱氢酶 SDRlIOC家族。对。口J^