种子的培养过程解析.pptVIP

微生物制药工艺及反应器 生物工程系讲师： 赵德胜 作业： 1、什么叫种子？种子培养过程有哪几个步骤？ 2、什么叫种子制备，种子制备分哪几个阶段？写出种子制备的一般流程。 3、种子及发酵？种醪？ Company Logo Company LOGO 第一章 种子的扩大培养 第一章 种子的扩大培养第一节 基本概念  1. 什么叫种子：处于休眠状态的菌种，经过斜面活化和液体培养后，成长为能够迅速生长成合格菌体的菌种，就是种子。 微生物制药工艺及反应器（第一章） 2. 种子制备：将沙土管或冷冻干燥管中处于休眠状态的生产菌种接入试管斜面活化后，再经过扁瓶或摇瓶及种子罐逐级扩大培养，从而获得一定数量和质量纯种的过程。  3. 接种菌龄：种子移种到下一级发酵罐前的培养时间。一般接种菌龄以对数生长的中后期为宜。  4. 种子及发酵：孢子或菌丝接入到体积较小的种子罐中，经培养后形成大量菌丝，这样的种子称为一级种子，把一级种子转入发酵罐内发酵，称为二级发酵，同理三级种子四级发酵。 微生物制药工艺及反应器（第一章） 5. 接种量：移种的种子液体积与培养液体积之比。接种量的大小是由发酵罐中菌体的繁殖速度决定的。  6. 混种法：种子液和发酵液混合作为种子。 7. 种醪（láo）：接入种子罐中的种子经过培养后所得的含有一定菌体浓度的种子液。 8. 专性好氧菌：只有在空气和氧分子存在的条件下才能生长的菌体。如抗生素、液体曲、有机酸等。 微生物制药工艺及反应器（第一章） 第二节 种子培养过程 一、种子培养过程 1. 种子培养过程分为四个步骤： ⑴ 将沙土孢子或冷冻孢子接种到斜面培养基中活化培养； ⑵ 从斜面孢子或菌丝移种到扁瓶固体培养基或摇瓶液体培养基中扩大培养； 微生物制药工艺及反应器（第一章） ⑶ 扩大培养的孢子或菌丝接种到一级种子罐或再至二级种子罐，制备种子； ⑷ 制备好的种子移种至发酵罐，开始发酵。 记忆方法： （活化培养、扩大培养、制备种子、移种发酵） 微生物制药工艺及反应器（第一章） 微生物制药工艺及反应器（第一章） 微生物制药工艺及反应器（第一章） 二、发酵种子制备工艺 1. 种子制备分两个阶段完成，实验室阶段和种子罐培养阶段。 ⑴ 实验室阶段 固体培养向液体培养转化——菌种斜面活化培养和三角瓶液体培养。 ⑵ 种子罐培养阶段 由实验室阶段的液体培养——向种子罐液体发酵培养转化。 微生物制药工艺及反应器（第一章） 2. 种子制备的一般流程： 种子→斜面种子活化培养→试管或三角瓶液体种子扩大培养→一级种子罐培养→二级种子罐培养→发酵罐发酵。 微生物制药工艺及反应器（第一章） 3. 种子应具备条件 ⑴ 菌种活力强，移种后能迅速生长，延迟期短；  （活力强） ⑵ 生理状态稳定； （状态稳） ⑶ 菌体总量及浓度满足大容量发酵罐要求； （量多浓度够） ⑷ 无杂菌污染，保证纯种发酵 ;（无污染） ⑸ 保持稳定的生产能力。 （高稳产） 微生物制药工艺及反应器（第一章） 4. 实验室种子制备  ⑴ 斜面种子培养：  沙土管或冷冻管中的菌种经无菌操作接入斜面培养基，目的——→活化菌种。   菌种（孢子或菌丝）→斜面培养基（固体）→   →菌丝→孢子 →菌丝 或 → 菌丝 微生物制药工艺及反应器（第一章） ⑵ 液体培养： 斜面试管培养→液体试管培养→三角瓶培养→种子罐培养（若是好的斜面种子直接进入液体种子罐）。 微生物制药工艺及反应器（第一章） 5. 生产车间种子制备  是指将实验室制备的孢子悬浮液或摇瓶种子接入种子罐，在罐中培养繁殖成为大量菌丝的过程。 ⑴ 种子罐级数的确定 种子罐级数——制备种子逐级扩大的次数。级数越多，菌体量越大。 微生物制药工艺及反应器（第一章） 种子罐级数的决定因素： ① 菌种的生长特性。不同的生长阶段对营养和培养条件的要求有差异，逐级扩大到能适应发酵罐生长的需要。 ② 孢子发芽及菌体生长繁殖速度； ③ 发酵罐容积。