马铃薯晚疫病水平抗性相关基因诱导表达谱及水平抗性机制初探-蔬菜学专业毕业论文.docxVIP

缩略词表英文缩写英文全称中文意义ABAabscissic acid脱落酸ADC缸ginine decarboxylase精氨酸脱毅酶AvrcDNAavirulent gene∞mplementary DNA无毒基因互补 DNAERFethyl巳ne responsive factor乙烯应答因子ESTexpressed sequen饵 tag表达序列标签ETethylene乙烯Eηfethephon乙烯利FAOFood and Agriculture Organization联合国粮农组织G-protein hpiGTP-binding protein hours poω刽st岱也- ∞u旧lati∞onG-蛋白接种后小时数HRhypersensitive response过敏性反应ISRinduced systemic resistance诱导系统抗性JAjasmonic acid莱莉酸LOXlipoxygenase脂氧合酶LRRleucine rich repeats富亮氨酸重复MAPKmítogen-activated protein kinase促细胞分裂原活化蛋白激酶MJmethyl jasmonate莱莉酸甲酶NOnitric oxíde一氧化氮PApolyamíne多肢PALphenylalanine ammonia lyase苯丙氨酸解氨酶PIproteinase inhibitor蛋白酶抑制子PlAphosphoIip路eA磷脂酶 APPOpolyphenoloxidase多盼氧化酶PRpathogenesís related病程相关QTLquantitative trait loci数量性状位点Rreslstance gene抗病基因ROSReactive oxidative specifies活性氧种类RT.PCRreverse transαíptPCR反转录聚合酶链式反应SAsaIicylic acid水杨酸SARsystemic acquired resistance系统获得抗性SSHsuppressíon subtractive hybridization抑制差减杂交TCAtricarboxylic acid cycle三段酸循环7摘要马铃薯(Solanum tuberosum L)是国际上第四大粮食作物。由致病疫霉菌 (Phytophthora infestans)I起的晚疫病是世界农业生产中最具破坏性的植物病害之 一，在世界各地广为流行，晚疫病防治一直为国际社会所关注。由于水平抗性是由 微效多基因控制的非小种专化抗性，抗性较为持久、稳定，所以选育广谱、持久的 水平抗性品种已成为马铃薯晚疫病抗性育种的必然趋势．目前，研究人员已开展了 水平抗性相关的数量性状位点(QTL)的定位以及差异表达基因分离、鉴定等工作， 但这些基因在晚疫病菌侵染期间的动力学表达模式、参与的防卫代谢途径和调控机 制以及水平抗性信号传导网络尚不清楚．为此，本研究应用cDNA微阵列技术，综 合分析了1009条马铃薯晚疫病水平抗性相关的表达序列标签(ESTs)在晚疫病菌和 不同非生物因子处理下的动态表达模式，并比较了这-此ESTs在不同抗性马铃薯品种 (系)中的表达差异，旨在揭示晚疫病水平抗性的分子基础，为有效利用水平抗性 提供理论依据与技术策略。主要研究结果如下：(1)以水平抗性马铃薯品系(OR；CIP Code：386209．10)叶片为材料，全面 分析了1009条ESTs在晚疫病菌侵染过程中的动态表达模式。以每个样点在接种与 对照样品中的杂交信号比值2．2为标准，筛选出669个显著差异表达ESTs，经测 序、比对、合并重复类型后，共得到348个代表不同基因的非重复序列片段(SingletonEsD，其中234个与已知功能基因(或ESTs)具有显著序列相似性，而其它114个则被暂定为未知功能ESTs(约占32．8％)。234个已知功能ESTs分属于13个功能 类别，即细胞防御、初级代谢、次级代谢、能量代谢、信号传导、转录调控、蛋白· 质合成、蛋白质降解、细胞运输、细胞结构、结合功能蛋白，系统性反应和发育。 根据鉴定基因的病原诱导表达模式，可将马铃薯对晚疫病菌的防卫过程大致区分为 三个明显时期，从而在分子水平上初步揭示了晚疫病菌侵染马铃薯叶片的自然过程， 并预测了这些事件发生的时间顺序以及参与每个阶段的基因．这些基因的病原诱导 表达谱可作为马铃薯防御机制深入研究的重要平台，并可为确定晚疫病水平抗性候 选基因及其参与的防御路径、调控机制等研究提供线索。(2)在上述348个晚疫病抗性相关基因中，包括98个代谢相关基因。根据这 些基因在晚疫病菌侵染后的动态表达模式，初步推断，共有11条代谢途径可被晚疫 病菌诱导激活，即莽草酸途径、