一株可降解聚己内酯的细菌菌株选育及其生物降解.pdfVIP

吉林农业大学学报　 ２０１７，３９（５）：５３９～５４３ ｈｔｔｐ：／ ／ ｘｕｅｂａｏ．ｊｌａｕ．ｅｄｕ．ｃｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ＪｉｌｉｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｅ⁃ｍａｉｌ：ｊｌｎｄｘｂ＠ｖｉｐ．ｓｉｎａ．ｃｏｍ 一株可降解聚己内酯的细菌菌株选育及其生物 降解过程∗ １ ２ ３ ３∗∗ 于　 丹 ，付　 晓 ，李　 凡 ，陈　 珊 １．长春医学高等专科学校，长春 １３００３１；２．华大基因，天津３００３０８；３．东北师范大学生命科学 学院，长春 １３００２４ 摘　 要：从啤酒厂排污口的活性污泥中分离筛选出１株能够产生聚己内酯（ＰＣＬ）解聚酶的细菌菌株。 经显 微镜观察其形态、生理生化特性试验及分子生物学手段１６Ｓ ｒＤＮＡ 序列分析比对，鉴定该菌株属于假单胞菌 属（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｐ．）。 液体培养条件下菌株可使ＰＣＬ膜在７２ ｈ 内完全降解，通过扫描电子显微镜对降解到 不同程度的ＰＣＬ膜进行表面形态结构观察，结果显示菌株对ＰＣＬ 薄膜的降解是菌株分泌的ＰＣＬ解聚酶的作 用，其降解模式是由薄膜表层平面到深层的立体降解。 质谱检测表明降解产物主要为ＰＣＬ单体与二聚体。 关键词：聚己内酯；生物降解；菌株选育；假单胞菌属 中图分类号：Ｘ１７２　 　 　 文献标识码：Ａ　 　 　 文章编号：１０００⁃５６８４（２０１７）０５⁃０５３９⁃０５ ＤＯＩ：１０．１３３２７／ ｊ．ｊｊｌａｕ．２０１７．３８３４ 引文格式：于丹，付晓，李凡，等．一株可降解聚己内酯的细菌菌株选育及其生物降解过程［Ｊ］．吉林农业大学学 报，２０１７，３９（５）：５３９⁃５４３． Ｂｒｅｅｄｉｎｇ ａｎｄ Ｂｉｏｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ ｏｆ Ａ ＰＣＬ Ｄｅｇｒａｄａｂｌｅ Ｂａｃｔｅｒｉａｌ Ｓｔｒａｉｎ １ ２ ３ ３∗∗ ＹＵ Ｄａｎ ，ＦＵＸｉａｏ ，ＬＩ Ｆａｎ ，ＣＨＥＮＳｈａｎ １．Ｃｈａｎｇｃｈｕｎ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｃｈａｎｇｃｈｕｎ １３００３１，Ｃｈｉｎａ；２．Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｇｅｎｏｍｉｃｓ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，Ｔｉａｎｊｉｎ ３００３０８，Ｃｈｉｎａ；３． Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｎｏｒｔｈｅａｓｔ Ｎｏｒｍａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈａｎｇｃｈｕｎ １３００２４，Ｃｈｉｎａ Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ａｓｔｒａｉｎｗｉｔｈｐｏｌｙ （ε⁃ｃａｐｒｏｌａｃｔｏｎｅ） （ＰＣＬ）ｄｅｇｒａｄａｂｌｅａｂｉｌｉｔｙｗａｓｉｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍａｃｔｉｖａｔｅｄ ｓｌｕｄｇｅ ｗｈｉｃｈ ｗａｓ ａｃｈｉｅｖｅｄ ｆｒｏｍ ｓｅｗａｇｅ ｄｉｓｐｏｓａｌ ｐｌａｎｔ ｉｎ ｔｈｅ ｂｒｅｗｅｒｙ． Ｔｈｅ ｓｔｒａｉｎ ｗａｓ ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ ａｓ Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｐ．ｂｙｃｏｌｏｎｙｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ，ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌａｎｄ １６ＳｒＤＮＡａｎａｌｙｓｉｓ．ＴｈｅＰＣＬｆｉｌｍｗａｓｄｅ⁃ ｇｒａｄｅｄ ｃｏｍｐｌｅｔｅｌｙ ｗｉｔｈｉｎ ７２ ｈ ｕｎｄｅｒ ｔｈｅ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ ｏｆ ｌｉｑｕｉｄ ｃｕｌｔｕｒｅ． Ｔｈｅ ｓｕｒｆａｃｅ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｏｆ ＰＣＬ ｆｉｌｍｓｗｈｉｃｈ ｈａｄ ｂｅｅｎ ｄｅｇｒａｄｅｄ ｆｏｒ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｄａｙｓ ｗａｓ ｏｂｓｅｒｖｅｄ ｗｉｔｈ ＳＥＭ，ａｎｄ ｉｔ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ＰＣＬ ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ ｏｃｃｕｒｒｅｄ ｆｉｒｓｔ ｉｎ ｔｈｅ ｓｕｒｆａｃｅ ｏｆ ＰＣＬ ａｎｄ ｔｈｅｎ ｉｎ ｔｈｅ ｄｅｅｐｅｒ ａｒｅａ． Ｔｈｅ ｍａｉｎ ｄｅｇｒａｄｅｄ ｐｒｏｄｕｃｔｓ ｏｆ ｔｈｅ ｓｔｒａｉｎｗｅｒｅｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄａｓＰＣＬｍｏｎｏｍｅｒ ａｎｄｔｗｏｐｏｌｙｍｅｒｓｂｙ ｍａｓｓｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｉｃａｎａｌ⁃ ｙｓｉｓ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ｐｏｌｙ⁃ｃａｐｒｏｌａｃｔｏｎｅ（ＰＣＬ）；ｂｉｏｄｅｇｒ