慢性乙型肝炎T淋巴细胞活化与免疫耐受相关性的初步研究-内科学专业毕业论文.docxVIP

硕士学位论文 硕士学位论文 中文摘要 摘 要 目的通过检测慢性乙肝患者外周血活化的CD4、CD8水平和 NKT细胞水平，探讨慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B，CHB)患者 外周血T淋巴细胞活化与HBV免疫耐受的关系。检测慢性乙肝患者 肝组织中的CD4+、CD8+T淋巴细胞和K细胞浸润特点，以阐明慢性 乙型肝炎患者其肝内T淋巴细胞和K细胞与I-IBV免疫耐受的相关 性。 方法(1)用淋巴细胞分离液分离15例正常人，30例CHB患者(15 例免疫耐受期患者，15例免疫应答期患者)的PBMC，用CD4．PE、 CD8．Pecy5、CD44．FITC、CD69．FITC、NKG2D．FITC抗体进行染色， 并以流式细胞仪检测CD4、CD8、CD44、CD69、NKT表达水平。但) 肝穿刺活检或手术切除标本25例，其中免疫耐受期10例，免疫应答 期10例，5例正常肝组织作对照，采用免疫组化方法分别检测肝组 织中CD4、CD8、K细胞分布。 结果慢性乙型肝炎免疫耐受期患者外周血中NKT、CD8+T及其 活化标志物CD44、CD69表达水平明显多于正常对照组(t=9。90，3．63， 12．41，13．40，P均O．01)，但NKT及CD8+T活化标志物CD44、CD69 明显少于免疫应答期患者(t=4．83，7．83，6．77，P均O．05)；慢性乙 型肝炎免疫耐受期和免疫应答期患者CD4+T细胞均低于正常对照组 (t=7．45，4．50 P均O．05)，但其活化标志物CD44、CD69均高于正 常对照组(t=12．88，9．29 P均O．01)。慢性乙肝患者外周血CD8T细 胞的活化标志物CD44表达水平与其HBV DNA呈负相关(r_0．563， P0．01)。 免疫耐受期患者肝内浸润的CD4+、CD8+T及K细胞数明显多于 正常肝组织，但明显少于免疫应答期患者。 结论慢性乙肝免疫耐受期患者外周血活化的T淋巴细胞明显低 于免疫应答期患者，肝组织内CD4+、CD8+T及K细胞在慢性乙型肝 炎的肝组织炎症损伤及肝内HBV清除中起重要作用；免疫耐受期患 者肝组织内T淋巴细胞浸润量低，它们可能是乙型肝炎慢性化的机制 之一，与免疫耐受可能有一定的关系。 关键词HBV感染，免疫耐受，NKT，CD44，CD69，T细胞活 化 硕士学位论文 硕士学位论文 英文摘要 objective To study the correlationship between T cell activating and immune tolerance on chronic hepatitis B(CHB)virus infection by detecting the CD4+、CD8+、CD44、 CD69 and NKT eell level of peripheral blood mononuclear cells(PBMC)．To investigate the characteristics of intrahepatic CD4+、CD8+T lymphocytes and K cell in immune tolerant phase of patients with chronic hepatitis B virus infection，and to explore the relationship between intrahepatic immune competent cells and the status of immune tolerance in chronic HBV infection． Method 1．PBMC were isolated from 15 healthy blood donors(as normal controls)，15 patients in immune tolerant phase and 15 patients in immune active phase by separating medium of lymphocytic cell．The PBMC was stained with anti．CD4 PE，anti．CD8 PE．cy5，anti．CD44 FITC、 anti-CD69 FITC and NKT FITC and all these cells analysised with flow cytometry． 2．Ten liv