SHBG基因敲除小鼠模型的建立及其表型分析-ChinaXiv.PDFVIP

中国生物工程杂志 China Biotechnology SHBG基因敲除小鼠模型的建立及其表型分析* 1 1 1＊＊ 1 1 1 1 2 孙一平 王越 金镇 王晓岩 孙磊 张璇 冯冲 周效华 （1. 中国医科大学附属盛京医院妇产科，沈阳 110004；2. 上海南方模式生物研究中心，上海 201203） 摘要：目的 建立性激素结合球蛋白 （SHBG）基因条件敲除小鼠模型，为探讨胎盘组织中SHBG 在体内的生理功能及其与妊娠期糖尿病发病关系提供实验手段。方法 首先运用生物信息学手 段确定小鼠SHBG基因组序列，构建SHBG打靶载体，以电穿孔方法将其导入小鼠ES细胞，筛 选培养阳性ES细胞并行PCR鉴定，并将正确同源重组的ES细胞注射进小鼠囊胚，移入受体小 鼠子宫；将获得的嵌合体小鼠与C57BL/6J小鼠交配，筛选后获得Flox小鼠，该小鼠与EIIa-Cre 转基因小鼠杂交，子代多次自交获得SHBG全身基因敲除(SHBG-/-)的小鼠。结果 运用同源重 1 组及ES细胞技术建立了SHBG基因的Flox 小鼠，并利用Cre/Loxp重组酶系统建立了SHBG基 v 8 因全身敲除小鼠模型，PCR方法从基因水平证明了SHBG基因Flox小鼠及SHBG基因全身敲除 6 6 小鼠模型建立成功。对基因敲除鼠进行初步表型分析发现：SHBG基因全身敲除小鼠的生长发 0 0 . 育与野生型小鼠相比无明显肉眼所见异常，SHBG基因全身敲除雌雄小鼠均具有生殖能力。结 7 0 论 成功建立SHBG基因全身敲除小鼠模型，通过对基因敲除鼠进行初步表型分析，发现SHBG 7 1 基因全身敲除小鼠外观上发育正常，为进一步研究SHBG在妊娠期糖尿病中的作用奠定了基础。 0 2 关键词：性激素结合球蛋白 条件性基因敲除 Cre/Loxp 妊娠期糖尿病 : v i X a n Establishment And Phenotype Analysis Of SHBG Knockout i h c Mouse Model ＊＊ SUNYi-ping WANGYue JIN Zhen1 1 1 WANGXiao-yan SUN Lei ZHANGXuan FENGChong1 1 1 1 ZHOU Xiao-hua2 （1. Department of Obstetrics and Gynecology，Shengjing Hospital，China Medical University，Shenyang 110004，China； 2. Shanghai Research Center for Biomodel Organism，Shanghai 201203，China） Abstract Objective To generate sex hormone binding globulin(SHBG)conditional knockout mice model. In order to investigate the physiologicalfunction of SHBG in vivo and to provide experimentalmeans forthe study of the relationship between SHBG * 国家自然科学基金资助项目 81300511） ＊＊通讯作者：金镇，电子信箱:jinzhen66@