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单分子技术研究T7解旋酶的解旋与换链
陈泽 马建兵 黄星榞 贾棋 徐春华 张慧东 陆颖
T7helicaseunwindingandstandswitchinginvestigated via single-molecular technology
ChenZe Ma Jian-Bing HuangXing-Yuan JiaQi XuChun-Hua Zhang Hui-Dong Lu Ying
引用信息Citation: ActaPhysicaSinica, ,118201(2018) DOI: 10.7498/aps.67
在线阅读Viewonline: /10.7498/aps.67
当期内容Viewtableofcontents: /CN/Y2018/V67/I11
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单分子技术研究T7解旋酶的解旋与换链
陈泽 马建兵 黄星榞 贾棋 徐春华
张慧东 陆颖
1) (陆军军医大学, 军事预防医学院毒理学研究所, 重庆 400038)
2) (中国科学院物理研究所, 北京凝聚态物理国家研究中心, 北京 100190)
3) (中国科学院大学物理科学学院, 北京 100049)
( 2018 年3 月20 日收到; 2018 年4 月10 日收到修改稿)
单分子荧光共振能量转移(smFRET) 和磁镊(MT) 技术目前广泛应用于研究分子马达. 相较于常规技
术, 其具有高精度及动态观测的优点. 本文研究对象为T7 解旋酶, 是六聚体解旋酶的典型代表. 研究表明, 这
′ ′
种解旋酶主要消耗脱氧胸苷三磷酸(dTTP) 提供能量, 且仅能沿着5 -3 单向进行行走和解旋工作. 目前对于
六聚体解旋酶的解旋和换链机制的认知仍然存在着诸多问题, 因此本文主要以此作为切入点开展研究. 首先
′
通过运用smFRET 技术研究T7 解旋酶在不同DNA 底物上的解旋现象, 发现其需要3 -尾链参与到解旋工作
中, 但其为单链或双链结构并无明显区别; 通过改变脱氧核糖核酸(DNA) 序列中的GC 含量, 发现T7 解旋酶
随着序列中GC 含量的升高会更容易在解旋过程中发生回退现象, 导致解旋长度明显缩短; 通过进一步分析
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