氯离子通道在大鼠低氧高二氧化碳性PASMC中的表达及与MAPK通路的关系-病理学与病理生理学专业毕业论文.docxVIP

温州医学院硕士学位论文氯离子通道在大鼠低氧高二氧化碳性PASMCs的表达及与 温州医学院硕士学位论文 氯离子通道在大鼠低氧高二氧化碳性PASMCs的表达及与 NAPK通路的关系 中文摘要 目的： 1．探讨低氧高二氧化碳条件下氯离子通道CLCA2、CLC3 mRNA和蛋白表达 的变化； 2．探讨低氧高二氧化碳条件下氯离子通道与MAPKs信号通路的关系。 方法： 1． 酶消化法取雄性SD大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)进行原代培养。 2． 采用小鼠抗大鼠SM Q—actin免疫荧光细胞化学法进行细胞鉴定。 3． 低氧高二氧化碳模型复SU-取第4至5代细胞，用无血清培养基培养24 小时去血清同步化后随机分成六组， (1)正常组(N)； (2)低氧高 二氧化碳组(H)；(3)DMSO组(D)；(4)U0126组(U)：(5)SB203580 组(SB)；(6)Anisomycin组(A)。正常组(N)于常氧(37℃、5％C02， 21％02，)条件下继续培养，其他组分别用U0126(10 u M)、SB203580 (10 u M)、Anisomycin(10 u M)和DMSO在低氧高二氧化碳(37℃、 P02 50—60mmHg，PC02 55—60 mmHg)条件下单独孵育细胞484时之后收 集细胞。 4． 采用免疫印迹法检