慢性氟中毒所致大鼠认知功能障碍的机理研究-神经病学专业毕业论文.docxVIP

徐州医学院硕士学位论文 徐州医学院硕士学位论文 慢性氟中毒所致大鼠认知功能障碍的机理研究 中文摘要 目的建立慢性氟中毒模型，研究慢性氟中毒所致大鼠认知功能障碍的机理。 方法用含不同浓度的氟化钠(O、50、100、150 mg／L)的蒸馏水喂养Wistar 大鼠6个月建立慢性氟中毒模型，采用V型迷宫和旷场分析实验检测模型大鼠的 认知行为功能改变；采用硫代巴比妥酸显色法测定丙二醛(MDA)含量，亚硝酸 盐法检测超氧化物歧化酶(SoD)活力水平：通过HE染色观察大鼠海马神经元的 变化；通过逆转录一聚合酶链反应(RT-PCR)和Western Blot方法观察细胞凋亡 相关基因B细胞淋巴瘤／白血病(Bcl．2)和白细胞介素1p转换酶(ICE)在慢性 氟中毒大鼠脑组织中mRNA和蛋白的表达水平；通过酶联免疫吸附测定法 (ELISA)和免疫组化方法分别检测血清中髓鞘碱性蛋白(MBP)的含量和观察 脑组织中MBP的表达。 结果 1．染氟组大鼠Y型迷宫学习记忆成绩低于正常对照组(尸O．05)，中、 高氟组表现更为明显(PO．01)，随着训练次数的增加，染氟组学习成绩提高。2．与 正常对照组相比，染氟组大鼠旷场试验中央格停留时间明显增高(PO．05)，跨格 次数及站立次数减低(尸O．05)；并且中央格停留时间随着训练天数的增加而减少， 而跨格次数及站立次数随着训练天数的增加而增加。3．低、中、高氟中毒组脑组织 MDA含量分别为(3．45 4-0．53)、(3．85 4-0．42)、(4．26 4-O．19)nmol／mgprot，高于 正常组(2．27 4-0．22)nmol／mgprot(PO．05)，并且脑组织中MDA的含量和染氟 浓度呈正相关(r--0．829，P0．05)。而低、中、高氟中毒组SOD水平分别为(167 士29．1)、(145 4-24．3)、(129 4-20．4)U／mgprot，低于正常对照(179 4-7．9)U／mgprot (尸0．05)，脑组织中SOD的含量和染氟浓度呈负相关(产．0．678，P0．05)。4．低、 中、高氟中毒组血清MBP浓度分别为(4．61 4-0．39)、(6．03 4-0．17)、(7．72 4-0．16) ng／ml，明显高于正常组(3．35 4-0．22)ng／ml(JPO．05)；并且血清中MBP的含量 2 徐州医学院硕士学位论文和和染氟浓度呈正相关(产O．970，P0．05)。免疫组化显示正常对照组海马区髓 徐州医学院硕士学位论文 和和染氟浓度呈正相关(产O．970，P0．05)。免疫组化显示正常对照组海马区髓 鞘细胞膜染色深，氟中毒组染色浅，并且氟浓度越大，染色越浅。5．HE染色 示慢性染氟组海马神经元细胞水肿，高氟组有凋亡小体出现；慢性氟中毒时脑组织 中的Bcl．2及ICE基因mRNA和蛋白的表达较正常对照组增加(pO．05)。 结论1．慢性氟中毒可以导致认知功能障碍。2．血清中MBP．的浓度和组织 中SOD及MDA的含量可以作为观察慢性氟中毒所致的认知功能障碍的生化指标。 3．慢性氟中毒所致的认知功能障碍，可能与Bcl．2和ICE参与神经细胞发生凋亡 的过程有关，并可能在此过程中起主要作用。 关键词慢性氟中毒；认知功能障碍；B细胞淋巴瘤／白血病．2；白介素．1p转 换酶 3 徐州医学院硕士学位论文Studies 徐州医学院硕士学位论文 Studies on the Mechanism of Cognitive Function Induced by Chronic Fluorosis Abstract objective To establish a rat model with chronic fluorosis and study on the mechanism of cognitive function induced by chronic fluorosis． Methods Animal model of chronic fluorosis was established with different levels of fluoridation(0、50、1 00、1 50 mg／L)feeding Wister rats six months；Y-maze and open field test were used to evaluate the changes of cognitive function of rats；the changes of hippocampus were observed using HE staining．RT-PCR and Western blot were used to detect the mRNA and