黄芩茎叶总黄酮对过氧化氢诱导人脐静脉内皮细胞氧化损伤的保护作用及其机制的研究毕业论文-中西医结合基础专业毕业论文.docxVIP

扬州大学硕士学位论文高浓度组、VC组细胞的凋亡率；以及采用western．blot法测定各组细胞凋亡抑制 扬州大学硕士学位论文 高浓度组、VC组细胞的凋亡率；以及采用western．blot法测定各组细胞凋亡抑制 蛋白Bcl．2的表达情况。 结果： 1．HUVEC氧化损伤模型的建立 1．1倒置显微镜观察不同浓度H202对HUVEC形态学的影响 损伤时间达N8d,时，H202低浓度组细胞损伤很明显，浓度稍高时，细胞损伤 严重，细胞变圆、肿胀，细胞膜边缘模糊不清，较多细胞脱落死亡。因而我们最 终选择了损伤时间为4／b时。此条件下，O．1mmol／L和0。2mmol／L H202损伤组与正常 组相比，细胞形态并无明显区别，0．5mmol／L和lmmol／L I-1202损伤组与正常组相比， 细胞形态稍有区别，但是细胞损伤尚不明显。2mmol／L HE02损伤组，与正常组比 较，细胞形态有明显变化，细胞有些变形，但细胞边界尚清楚。4mmol／L I-1202损 伤组细胞变形明显，胞膜边缘不清晰，有较多细胞脱落。 1．2不同浓度H202对HUVEC氧化损伤的影响 ①各浓度H202损伤组与正常对照组相比细胞活力(OD值)均有统计学差异 (P0．01)；②O．5mmol／L、lmmol／L H202损伤组与正常组比较，LDH活性差异有统 计学意义(PO．05)，2mmol／L、4mmol／L HE02损伤组和正常组相比，LDH活性差 异统计学意义显著(Po。01)。 2．SSTF对HUVEC氧化损伤的保护作用及其机制的研究 2．1保护作用 ①除SSTF低浓度组与H202损伤组比较，细胞活力(oD)值差异无统计学意义 外(P0．05)，其它两组药物组与H202损伤组相比，差异有统计学意义(Po．05或 P0．01)；②SSTF各浓度组细胞培养液中LDH活性均明显低于H202损伤组(P0．05 或P0．01)。 2．2保护机制 ①SSTF各浓度组细胞培养液q，MDA含量明显低于H202损伤组(P0．05或 P0．0I)；②SSTF各浓度组细胞培养液q了SOD活性均明显高于H202损伤组(Po．05 曹致超：SSTF对过氧化氢诱导HUVEC氧化损伤的保护作用及其机制的研究 曹致超：SSTF对过氧化氢诱导HUVEC氧化损伤的保护作用及其机制的研究 3 P或P0．01)；③SSTF组细胞凋亡率明显低于H202损伤组(PO．01)；(至)H2025P．伤 组Bcl．2蛋白表达水平明显低于正常组(Po．01)，SSTF各浓度组Bcl一2蛋白表达水 平明显高于H202损伤组(P0．01)。 结论： 1．H202体外诱导HUVEC氧化损伤模型的建立：2mmol／LH202作用4小时，为适 合本实验研究的最佳条件。 2．SSTF可对抗H202，提高细胞活力，降低LDH的活性，从而对氧化损伤的HUVEC 起到保护作用。 3．SSTF对氧化损伤HUVEC的保护机制可能与对抗自由基，降低脂质过氧化物 MDA的含量、增加SOD的活性、上调Bcl．2蛋白的表达从而抑制细胞凋亡有关。 关键词：黄芩茎叶总黄酮人脐静脉内皮细胞过氧化氢氧化损伤 扬州大学硕士学位论文4一一————————————————，_——————●—————————————————————一 扬州大学硕士学位论文4 一一————————————————，_——————●—————————————————————一 Study of the protective Effect and the mechanism of SSTF on HumanUmbilical Vascular Endothelial Cells following oxidative inj ury ABSTRACT objectives： In our study，we established oxidative damage model of human umbilical vascular endothelial cells(HUVECs)by using hydrogen peroxide(H202)to injure HUVEC，and investigated the protective effects and mechanisms of SSTF on HUVEC following oxidative injury． Methods： 1．The foundation of oxidative injury model of HUVEC HUVEC were cultured in vitro．They were divided into normal control group and nine oxi