面神经失神经支配后口轮匝肌酶组织化学研究-耳鼻咽喉学专业毕业论文.docxVIP

面神经失神经支配后面肌线粒体变化的实验研究中文摘要 面神经失神经支配后面肌线粒体变化的实验研究 中文摘要 目 的 面神经麻痹后将引起一系列面肌瘫痪症状，面肌的机能和组织学都将 随着时间的不同而发生不同程度的病理变化。但是，目前对面神经麻痹的 研究也多只限于对面神经本身的观察，而对与面神经共同构成一个完整运 动单位所必需的重要组成部分一一面肌却很少重视。口轮匝肌是面肌中比 较有代表意义的一块肌肉，也是临床上早期预后诊断的重要检查部位：本 文从酶组织化学角度对面神经失神经支配后口轮匝肌琥珀酸脱氢酶(SUCCi— nate dehydrogenase，SDH)、乙酰胆碱酯酶(acetylchotinesterase，Ache)及 ca“一ATP酶(Ca。一ATPase)进行了光、电镜观察及计算机定量分析，并 探讨面神经不同程度失神经支配后口轮匝肌琥珀酸脱氢酶，乙酰胆碱酯酶， Ca“一ATP酶的光镜及电镜变化，及失神经支配对口轮匝肌线粒体、三联体 及运动终板形态和超微结构的影响，旨在对面神经失神经支配后面肌的能 量代谢、结构及肌细胞的病理变化作一基础研究，并对临床工作进行指导 及提供理论依据。 方 法 制造豚鼠面神经麻痹模型，分为面神经压榨15s组、30s组、切断组，每 组再分为1周组、1月组，并进行如下观察：(1)琥珀酸脱氢酶染色后，光 镜及透射电镜观察各组口轮匝肌线粒体结构和琥珀酸脱氢酶阳性产物的变 化。(2)采用琥珀酸脱氢酶和乙酰胆碱酯酶结合酶组织化学染色方法，并 应用LUZEX—F计算机图象分析系统测试各组肌纤维乙酰胆碱酯酶含量的 灰度值。通过透射电镜观察各组运动终板结构和乙酰胆碱酯酶阳性反应产 物的变化。(3)光镜观察采用ca“一ATP酶酶组织化学染色方法，并应用 LUZEX—F计算机图象分析系统测试各组肌纤维Ca“一ATP酶酶含量的灰 度值，对所得数据进行两样本均数差别的t检验。通过透射电镜观察各实 验纽三联体结构和Ca“一ATP酶阳性反应产物的变化。结 验纽三联体结构和Ca“一ATP酶阳性反应产物的变化。 结 果 根据琥珀酸脱氢酶呈色反应程度及酶反应颗粒的多少，可将口轮匝肌 的肌纤维分为二种类型，即红肌纤维和中间型肌纤维。红肌纤维呈深蓝色， 酶颗粒较多，一般直径较小；中间型肌纤维呈蓝色，酶颗粒较少，直径多较 大。，面神经失神经支配后一周口轮匝肌琥珀酸脱氢酶呈色反应程度减弱， 其减弱程度：断组压榨30秒组压榨15秒组(P0．01)。在15秒组， 二型肌纤维琥珀酸脱氢酶染色均有所减弱，肌纤维萎缩，有的肌纤维形状略 不规则；在30秒组，二型肌纤维酶活性下降较明显，部分中间肌肌纤维染色 已稍不清晰；在断组，二型肌纤维染色明显减弱，酶反应颗粒明显减少，并有 扩散现象。一个月后有所恢复，其恢复程度：压榨15秒组压榨30秒组。 电镜下，琥珀酸脱氢酶阳性反应产物为高电子密度颗粒，定位于线粒体的内 外膜上以及内外膜间腔内。面神经损伤后1周，口轮匝肌线粒体结构破坏， 阳性反应颗粒稀疏。在15秒组可见酶反应颗粒有所减少；在30秒组，线粒 体部分嵴断裂，SDH阳性反应产物减少较明显；在断组，线粒体大部分嵴断 裂甚至消失，酶反应颗粒非常稀疏。面神经损伤后1月，口轮匝肌线粒体结 构及SDH酶活性均有所恢复，其恢复程度：压榨15秒组压榨30秒组。 在15秒组，线粒体结构及酶反应颗粒已基本恢复正常；在30秒组，线粒体 仍有部分嵴断裂，酶反应颗粒较稀疏。面神经失神经支配后乙酰胆碱酯酶 酶活性亦减弱，其灰度值为：15s l周组为60．4545±4．3561；30s 1周组为 一55】818±1．2194，与15s 1周组间差异有显著性(P0．01)；断组l周组为 72 8926±7．3511，与30sl周组间有显著性差异(P0．01)。15s 1月组为 62。8641±7．8189，30s 1月组为64．4570±2．2539，两组间差异显著(P0． 01) 电镜观察切断1周组运动终板突触数目减少，损伤明显；15s 1月组 运动终板和乙酰胆碱酯酶阳性反应产物恢复明显；30s 1月组有轻度恢复。 面神经失神经支配后一周口轮匝肌ca“一ATP酶酶活性减弱，其损伤程 度：断组压榨30秒组压榨15秒组；一个月后有所恢复，其恢复程度： 压榨15秒组压榨30秒组。电镜观察可见口轮匝肌三联体结构破坏， 面神经损伤越重，三联体结构破坏越严重。 结 结 论 正常情况下，口轮匝肌在面神经的支配下进行收缩进而与其它面肌相 配合以完成各种面部表情动作。失渖经支配后，面神经与口轮匝肌失去丁 正常的联系，导致肌纤维内部结构受损，能量代谢降低，各种生理功能受影 响，琥珀酸脱氢酶催化三羧酸循ff：【{】唬珀酸与延胡索酸之间的反n．年量 皂琥珀酸氧化呼吸链中最重要的酶之一，它主