高考生物二轮复习dna和蛋白质技术名师公开课市级获奖课件（全国通用）.pptxVIP

专题5　DNA和蛋白质技术专题整合提升内容索引知识系统构建规律方法整合热点考题集训知识系统构建DNA的① 原理DNA的② 原理提取基础知识实验设计鉴定DNA的粗提取与鉴定③ 的选取DNA的④_______DNA的⑤ 与鉴定实验材料粗提取DNA和蛋白质技术纯化⑥ 原理PCR的⑦_________PCR基础知识实验设计多聚酶链式反应扩增DNA片断反应过程PCR操作⑧ 的测定DNA含量凝胶色谱法缓冲溶液⑨_____基础知识实验操作DNA和蛋白质技术血红蛋白的提取和分离电泳⑩ 处理? 操作样品凝胶色谱必背要语1.DNA不溶于酒精，但是细胞中的某些蛋白质溶于酒精，可利用酒精将DNA和蛋白质分开。2.DNA在0.14 mol/L NaCl溶液中溶解度最低。3.PCR原理：DNA热变性原理。PCR每次循环都包括变性、复性和延伸三步。4.DNA聚合酶不能从头开始合成DNA，只能从3′端延伸DNA链。DNA的合成方向总是从子链的5′端向3′端延伸。5.利用凝胶色谱法分离蛋白质时，相对分子质量大的先洗脱出来，相对分子质量小的后洗脱出来。6.在电泳中，待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状都会影响分子的迁移速度。7.SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳的迁移率完全取决于分子的大小。8.蛋白质提取和分离的一般步骤是：样品处理与粗分离、纯化和纯度鉴定。9.在对蛋白质进行纯度鉴定时，使用最多的方法是SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳。规律方法整合整合一　DNA的粗提取与鉴定中的“234”加蒸馏水2次①加到鸡血细胞液中，使血细胞吸水破裂②加到含DNA的2 mol/L的NaCl溶液中，使NaCl溶液的物质的量浓度下降到0.14 mol/L，DNA析出用纱布过滤3次①过滤血细胞破裂液，得到含细胞核物质的滤液②过滤溶有DNA的2 mol/L的NaCl溶液③滤取0.14 mol/L的NaCl溶液中析出的DNA(黏稠物)用NaCl溶液4次①加2 mol/L的NaCl溶液，溶解提取细胞核物质②用0.14 mol/L的NaCl溶液使DNA析出③用2 mol/L的NaCl溶液，溶解滤取的DNA黏稠物④用2 mol/L的NaCl溶液，溶解丝状物用于鉴定DNA例1　将粗提取的DNA丝状物分别加入0.14 mol/L NaCl溶液、2 mol/L NaCl溶液、体积分数为95%的酒精溶液中，然后用放有纱布的漏斗过滤，分别得到滤液P、Q、R以及存留在纱布上的黏稠物p、q、r，其中由于含DNA少可以丢弃的是A.P、Q、R B.p、q、r C.P、q、R D.p、Q、r解析　DNA在0.14 mol/L NaCl溶液中溶解度最小，过滤后DNA在黏稠物p中，可以丢弃P；DNA在2 mol/L NaCl溶液中溶解过滤后，DNA在滤液中，可以丢弃q；DNA不溶于体积分数为95%的酒精溶液，所以过滤后DNA在黏稠物r中，可以丢弃R。解析答案整合二　去除DNA滤液中杂质的三种方案项目原理方法方案一DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同在滤液中加入NaCl，使NaCl溶液物质的量浓度为2 mol/L，过滤除去不溶的杂质；再调节NaCl溶液物质的量浓度为0.14 mol/L，析出DNA，过滤除去溶液中的杂质，再用物质的量浓度为2 mol/L的NaCl溶液溶解DNA方案二DNA对酶的耐受性直接在滤液中加入嫩肉粉，反应10～15 min，嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能够分解蛋白质方案三DNA对高温的耐受性将滤液放在60～75 ℃的恒温水浴箱中保温10～15 min，注意严格控制温度范围，使蛋白质沉淀而DNA分子还未变性，可将DNA与蛋白质分离例2　如图表示以鸡血为实验材料进行DNA的粗提取与鉴定的操作程序，请分析回答问题。(1)步骤一中，向鸡血细胞液中加入 并搅拌，可使鸡血细胞破裂。蒸馏水解析　第一步加入蒸馏水的目的是使红细胞涨破，释放出核物质。(2)步骤二：过滤后收集含有DNA的 。滤液解析　第二步收集含有核物质的滤液。解析答案(3)步骤三、四的操作原理是_________________________________________ 。步骤四通过向溶液中加入 调节NaCl溶液物质的量浓度至 mol/L，DNA将会析出，过滤去除溶液中的杂质。DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，通过控制NaCl溶液的浓度去除杂质蒸馏水0.14解析　由于DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同，所以通过控制NaCl溶液的浓度可以分别溶解DNA和析出DNA，并且对 DNA进行提纯；第四步加入蒸馏水的目的是逐渐稀释NaCl溶液，使其物质的量浓度为0.14 mol/L，这时DNA在NaCl溶液中溶解度最低，可以析出DNA。解析答案(4)步骤七：向步骤六过滤后的 中，加入等体积的冷却的_____