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GE Healthcare Life Sciences 非标记生物物理技术 分子间相互作用及生物大分子稳定性解析 1 概论 亲和力 生物体内分子间的相互作用是维持生命活动的基础。对分子间相互作用的正确分析是了解生命活动十分必要和必须的：分子间是否存在 结合 （相互作用），结合的快慢、结合的强弱，结合的机理、驱动力 所有这些对于分子间相互作用的研究常常都需要采用生物物理 的方法来进行，目前应用的一些研究分子间相互作用的技术的前提都是需要提前对作用的分子进行标记处理，但标记的处理常常会导致 分子不是处于真正的原位环境，而且标记的处理会带来其他无法预测的额外因素，为分子间相互作用的研究增加了难度；而来自于GE 医疗集团生命科学部的表面等离子共振技术 （Biacore ）和微量热技术 （Microcal ）却很好地克服这些缺陷，它们的特点是：非标记、原 位、微小、灵敏、快速，动态的、全过程地实时、定量表征结合的过程；而且这二者技术得到信息的相互补充、相互印证可以为我们正 确全面判定分子间相互作用的全面机制，提供充分的信心：不仅可定量研究结合的快慢 （ka\kd ），结合的强弱 （Ka\G ）；而且可定量 研究结合的位点 （n ），结合的驱动力及机理 （△G\△H\△S ），并且可评判结合的稳定性。所有这些都十分有助于我们的生命科学研究 工作者对生命本质的认识。 • 分子间间的相互作用- 亲和力对生命科学意味着很多 • 可以帮助我们了解生物学过程和分子识别过程 • 驱动药物先导物的产生和发现 • 选择最优的生物药物 • 优化药物的安全性和药效 • 优化药物剂型和制造工艺 • 监控制造工艺过程中蛋白质的质量 但是亲和力并不是一切 因为 ， 2 同样的亲和力 不一样的动力学 结合\解离速率 ， （ ） Biacore是能够测定分子间结合及解离速率的方法。仪器的原理在下面的章节中介绍，这里要说明的是通过Biacore能够获得的信息 （下 图）：同样的亲和力，却可以有两种不同结合、解离速率的动力学过程。这些与速率有关的信息，成为用于药品开发的强有力的工具。 例如，人们需要安眠药物能够及早发挥效果。如果在有多个候选对象药物，就需要通过Biacore来选择能从受体中快速解离的药物。反 之，为了实现抗癌药物那样能够在体内长时间内保持药效的应用，就要选择解离速度慢而能够长时间与受体结合的候选药物。 快速结合快速解离的反应 慢速结合慢速解离的反应 结合快/解离快 同样的亲和力 结合慢/解离慢 Biacore能实时镜面反映生物反应过程的动力学全过程，这是单点测试筛选 （只是亲和力的测试）无法做到的，但是Biacore能做到。 3 同样的亲和力 不一样的热力学 ， 件下，蛋白质通常没有紧致而特定的结构。就没有其生物学功 能。在这个意义上，我们说，基因一旦被表达，即被翻译成一定 的多肽序列，热力学就代替生物学机制起主导作用将原本是柔 性、不规则的多肽链就折叠为生物学功能所需