慢性粒细胞白血病基因表达谱的实验研究-内科血液病学专业毕业论文.docxVIP

英文缩略词表英文缩写 英文缩略词表 英文缩写 英文全称 中文全称 瓦面广A—mp—icillin 氨苄青霉素 bcr／abl bcr／abl fusion gene bcr／abl融合基因 bp Basepair 碱基对 CML Chronic Myeloid Leukemia 慢性粒细胞白血病 DNA Deoxyribonucleic Acid 脱氧核糖核酸 dNTP Deoxynucleoside Triphosphate 脱氧三磷酸腺苷 E．coli Escherichia coli 大肠杆菌 FBS Fetal Bovine Serum 胎牛血清 Hepes N一2一hydroxyethylpiperazine 羟乙基哌嗪乙黄酸 INF．Q Interferon alpha 干扰素一Ⅱ INF一Ⅱ Interferon alpha 干扰素．Ⅱ IRF haterferonRegulatoryFactor 干扰素调节因子 JAK Janus ginase Janus激酶 kD Kilodalta 千道尔顿 LB Luria-Bertani Medium LB培养基 LIF Leukemia Inhibitory Factor 白血病抑制因子 LIFR Leukemia Inhibitory Factor Receptor 白血病抑制因子受体 mg Milligram 毫克 ml Milliliter 毫升 mRNA Messenger RNA 信使核糖核酸 OD Optical Density 光密度 PCR Polymerase Chain Reaction 聚合酶链反应 RNA Ribonucleic Acid 核糖核酸 SDS Sodium Dodecyl Sulphate 十二烷基黄酸钠 SSH Suppression subtractive hybridization抑制性消减杂交 STAT 鬟粤lal T ransducer and Activator of 信号转导子和转录活化子 I玎“岱c玎pnon gamma 中文摘要／慢性粒细胞白血病(chronic 中文摘要 ／慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia，CML)是血液系统最常见的 恶性疾病之一，在国内年发病率约为0．36／10万，占急慢性白血病的第三位。 其分子生物学特征是存在bcr／abl融合基因，该基因转录为8．5Kb mRNA，进一 步翻译产生分子量为210KDa的BCR／ABL融合蛋白，后者具有异常增高的酪氨 酸激酶活性，使造血干细胞发生异常转化而导致CML发生。CML在临床上分为 慢性期、加速期和急变期，自然病程平均31个月。近几十年来，由于异基因 造血干细胞移植、干扰素及联合化疗的临床应用，cML患者的生存期明显延长， 部分患者被治愈甚至长期无病生存。但是在未进行造血干细胞移植的患者中仍 有大约50～60％发病后5年内发生急变，因此CML急变机制的研究一直是国内 外学者关注的热点之一。 目前普遍认为，CML急变是一个多基因多途径相互作用相互影响的过程， 由于现在的研究只能一次针对少数几个基因，得到的仅仅是个别的片面的结 论，影响了CML急变机制的研究。近几年出现的DNA芯片技术，可以对目的基 因进行高通量的检测，获得海量的信息，全面系统地了解遗传信息与生物状态 的关系。我们应用该技术对CML慢性期和急变期骨髓单个核细胞的基因表达差 异进行了检测，在被检测的1176个基因中，有51个基因在急变期显著上调， 其中转化因子类12个，细胞调节蛋白类11个，细胞表面抗原类8个，代谢类 5个，其它类基因15个，上调10倍以上的基因多达18个。我们发现锌指蛋白 基因在急变期显著高表达，以往有个别文献报道，急变期CML锌指蛋白基因 Evi—l表达增加，我们也认为Evi—l基因与嗍L急变有关。另外和急变有关的 就是G蛋白相关基因，因为在本实验中有11个此类基因显著高表达，而且有 文献指出，G蛋白n。。亚单位高表达时，恶性肿瘤细胞株的转移力或侵袭力就 增强。此外还发现17个基因仅在急变期的CML中表达，而在慢性期无表达。 尽管本实验发现了诸多差异基因，而且部分基因差异特别显著，但是相当一部 分基因目前没有与白血病有关的资料报道，现仅能为以后的研究提供～条思 路。 干扰素一a(INF—a)是目前治疗CML首选药物之一，它不仅可以明显缓解 CML患者的临床症状，而且能使部分病人获得完全细胞遗传学缓解，少数患者 可获得持续性遗传学缓解而达到长期生存。但是IFN一Ⅱ治疗CML的作用机制目 前尚不十分清楚，众多的实验研究表明，INF—n可能牵涉到许多基因的相互作 用相互调节，如：原癌基因和抑癌基因：凋亡和抗凋亡基因等。我们用DNA芯 片对[