霉酚酸酯及氯沙坦对单侧输尿管梗阻大鼠肾脏的保护作用-肾脏内科学专业毕业论文.docxVIP

郑州大学2004届硕士毕业论文 郑州大学2004届硕士毕业论文 霉酚酸酯及氯沙坦对单侧输尿管梗阻大鼠肾脏的保护作用 霉酚酸酯及氯沙坦对单侧输尿管梗阻大鼠肾脏的保护作用 研究生 李军辉 导师李红刘章锁 郑州大学第一附属医院 肾内科 郑州450052 摘 要 【背景与目的】肾小管间质病变程度是进展性肾脏损害过程中最重要影响因素． 其影响程度较肾小球病变的严重程度更为重要。延缓肾间质纤维化的进展，可 降低终末期肾病(ESRD)的发生率。肾小管间质中炎症细胞浸润是肾间质纤维 化形成中关键的一步，它分泌的趋化物质和细胞因子～方面促进炎症的发生， 另外还能刺激其他细胞如成纤维细胞，小管上皮细胞的分泌增生以及转分化 成肌成纤维细胞(MyoF)．MyoF过度增殖产生的过多细胞外基质(ECM)可导致肾 小球滤过面积下降，最终导致肾功能衰竭。霉酚酸酯(MMF)是一种新型的免疫 抑制剂，经口服后在体内迅速转化为具有免疫抑制作用的活性产物霉酚酸 (MPA)。MPA通过抑制细胞鸟嘌呤核苷酸(GTP)的生物合成来阻断DNA和RNA的 合成，进而抑制炎症细胞的增生。有研究观察了5／6肾切除及单侧输尿管梗阻 (UUO)模型中，MMF对肾间质病变进展的影响，发现MMF治疗后可减少肾小 球浸润细胞的数量，包括主要抑制淋巴细胞功能和单核细胞浸润，抑制炎症， 并使内皮细胞与肾小管上皮细胞粘附分子表达量减少，从而减轻肾间质纤维 化。MMF除了对炎症的抑制作用外，还可作用于免疫系统以外的某些细胞， 有人报道MMF可以抑制成纤维细胞、血管平滑肌细胞，、系膜细胞的增殖，减 少细胞外基质的沉积，已有实验证明MMF对非免疫性疾病所导致的慢性’肾脏 纤维化也有～定疗效，若同时纠正肾素一血管紧张素系统(RA$)紊乱，可能会 有更好的肾脏保护作用。为此本实验采用单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠模型，观 察霉酚酸酯及与氯沙坦合用对肾脏的保护作用，并初步探讨其可能的作用机 制。 郑州大学2004届硕士毕业论文 郑州大学2004届硕士毕业论文 霉酚酸酯及氯沙埋型皇型塑垦筻塑堕奎堕堕竺塑堡塑堡旦 【方法】雌性sD大鼠(购于郑州大学医学院实验动物中心)，6--8周龄，体 重(200±20)g。动物随机分成5组，分别为C组(假手术组)6只，UUO组 (手术组)6只， UUO+～IMF组(霉酚酸酯治疗组)6只，UUO+ARB组(氯沙坦 治疗组)6只，UUO+MMF+ARB组(霉酚酸酯联合氯沙坦治疗组)6只。药物治 疗组分别于术前l天及术后给予霉酚酸酯(Mycophenolate mofetil 25mg·kg～·d’1)，氯沙坦(Losartan 50mg·kg～·d。)，霉酚酸酯联合氯沙 坦(剂量同前)混悬液灌胃，假手术组及手术组每天灌胃同体积生理盐水。在 术后第14天收获动物。应用鼠尾血压计测量血压；取血标本及24小时尿标 本测定血清肌酐、尿肌酐、尿蛋白定量；取梗阻侧肾脏做组织学和免疫组织 化学检查，组织学检查做HE及Masson染色，光镜观察肾间质纤维化情况。 免疫组织化学检查采用SP法进行检测肾组织中的TGF一8．、ⅡI型胶原、d—SlⅥA 的表达，数据以it 5表示，多组间均数比较采用单因素方差分析． 【结果】1．血压及血、尿生化检测：与假手术组相比，UUO组及各药物治疗组 大鼠14天的收缩压、肌酐清除率、24小时蛋白尿定量均无明显变化(乃O．05)。 2．大鼠肾组织的病理学改变：与假手术组相比，HE及Masson染色显示UUO 14 天肾小管上皮细胞萎缩，管腔扩张，弥漫的单核、淋巴细胞浸润和成纤维细胞 增生及胶原纤维化形成，纤维化程度明显；药物治疗组间质细胞减少，尤其 MMF及联合用药组细胞浸润明显减少，14天纤维化程度较轻(P0．05)。3．大 鼠l肾组织的免疫组织化学改变①小管间质d—SMA表达：与假手术组相 比，UUO组及各药物治疗组除在血管平滑肌处有表达外，在小管fB7质d—SMA表 达均增高(P0．05)，各治疗组14天Ⅱ一SMA表达均显著低于同时限UUO组 (PO．05)，MMF组低于ARB组，但无统计学差异，联合用药组表达明显低于单 用药组(尺0．05)。②小管间质TGF一目。表达：与假手术组相比，UUO组及各 药物治疗组TGF—B-表达均增高(只O．05)，各治疗组14天TGF—B．表达均显著 低于同时限UUO组(P(O．05)，联合用药组表达更低于单用药组(PO．05)。⑧ 小管间质Ⅲ型胶原表达：与假手术组相比，UUO组及各药物治疗组IⅡ型胶原表 达均增加(尺O．05)，各治疗组14 KmN,NNa／a均显著低于同时限UUO组 (PO．05)，且联合用药组表达更低于单用药组(PO．05)。 【结论】1．霉酚酸酯可通过抑制炎陡细胞浸润，下调TGF—B。、Q—sMA表达