第十五章分离分析法导论2.pptVIP

* * 第三节 色谱分析的基本理论 色谱分析的目的是将样品中各组分彼此分离，组 分要达到完全分离，两峰间的距离必须足够远， 两峰间的距离是由组分在两相间的分配系数决定 的，即与色谱过程的热力学性质有关。 但是两峰间虽有一定距离，如果每个峰都很宽， 以致彼此重叠，还是不能分开。这些峰的宽或窄 是由组分在色谱柱中传质和扩散行为决定的，即 与色谱过程的动力学性质有关。 要从热力学和动力学两方面来研究色谱行为。 * 第三节 色谱法基本原理 沿柱移动距离 L A B A B KA KB 下图是 A、B两组分沿色谱柱移动时，不同位置处的浓度轮廓。 * 第三节 色谱法基本原理 图中KAKB ，因此，A组分在移动过程中滞后。随着两组分在色谱柱中移动距离的增加，两峰间的距离逐渐变大，同时，每一组分的浓度轮廓（即区域宽度）也慢慢变宽。显然，区域扩宽对分离是不利的，但又是不可避免的。若要使A、B组分完全分离，必须满足以下三点： 第一，两组分的分配系数必须有差异； 第二，区域扩宽的速率应小于区域分离的速度； 第三，在保证快速分离的前提下，提供足够长的色谱柱。 * 第三节 色谱法基本原理 一个色谱理论，不仅应说明组分在色谱柱中移动的速率，而且应说明组分在移动过程中引起区域扩宽的各种因素。 塔板理论和速率理论 （以分配系数恒定为前提，称为线性色谱理论） * 第三节 色谱法基本原理 塔板理论（半经验理论） 把色谱柱比作一个分馏塔，将色谱分离过程比拟作分馏过程，沿用分馏塔中塔板的概念来描述组分在两相间的分配行为，将连续的色谱分离过程分割成多次的平衡过程的重复.同时引入理论塔板数作为衡量柱效率的指标。塔板理论假设： 1. 在柱内一小段长度H内，组分可以在两相间迅速达到平衡。这一小段柱长称为理论塔板高度H; 2. 以气相色谱为例，载气进入色谱柱不是连续进行的，而是脉动式，每次进气为一个塔板体积（ΔVm）; 3. 所有组分开始时存在于第0号塔板上，而且试样沿轴（纵）向扩散可忽略; 4. 分配系数在所有塔板上是常数，与组分在某一塔板上的量无关。 * 第三节 色谱法基本原理 在每一块塔板上，溶质在两相间很快达到分配平衡，然后随着流动相按一个一个塔板的方式向前移动。对于一根长为L的色谱柱，溶质平衡的次数应为： n = L / H n称为理论塔板数。色谱柱的柱效随理论塔板数n的增加而增加，随板高H的增大而减小。 塔板理论指出： 第一，当溶质在柱中的平衡次数(n)大于50时，可得到基本对称的峰形曲线。而在色谱柱中n值一般很大，如气相色谱柱约为103 ~ 106 ，因而这时的流出曲线可趋近于正态分布曲线。 * 第三节 色谱法基本原理 第二，当样品进入色谱柱后，只要各组分在两相间的分配系数有微小差异，经过反复多次的分配平衡后，仍可获得良好的分离。 第三，n与半峰宽及峰底宽的关系式为： 式中tR与Y1/2 ( Y )应采用同一单位（时间或距离）。 从公式可以看出，在tR一定时，如果色谱峰很窄，则说明n越大，H越小，柱效能越高。 * 第三节 色谱法基本原理 实际工作中，由上述公式 计算出来的的n和H值有时并不能充分地反映色谱柱的分离效能，因为采用tR计算时，没有扣除死时间t0，所以常用有效塔板数n有效表示柱效： 在相同的色谱条件下，对不同的物质计算的塔板数不一样，因此，在说明柱效时，除注明色谱条件外，还应指出用什么物质进行测量。 * 第三节 色谱法基本原理 例 已知某组分峰的峰底宽为40 s，保留时间为400 s ，计算此色谱柱的理论塔板数。 解： n = 16 ( tR / Wb)2 = 16 ? （400 / 40）2 = 1600 块 * 第三节 色谱法基本原理 从塔板理论可以得到： （1）色谱流出曲线的形状； （2）当色谱柱长度一定时，塔板数 n 越大(塔板高度 H 越小)，被测组分在柱内被分配的次数越多，柱效能则越高，所得色谱峰越窄； （3）柱效不能表示被分离组分的实际分离效果，当两组分的分配系数K相同时，无论该色谱柱的塔板数多大，都无法分离。 不足： 无法解释同一色谱柱在不同的载气流速下柱效不同的实验结果，也无法指出影响柱效的因素及提高柱效的途径。 * 第三节 色谱法基本原理 速率理论—— 动力学理论 1956年van Deemter（范第姆特，荷兰）提出 吸收了塔板理论中板高的概念、考虑组分在两相间的扩散和传质过程，解释影响板高的各种因素。气相、液相色谱都适用。