米团花多糖的分离纯化,结构鉴定及体外抗氧化活性分析-食品科学专业毕业论文.docxVIP

万方数据 万方数据 摘要 本研究以米团花为对象，优化了超声波提取米团花多糖的工艺条件；对米团花多糖进 行了分离、纯化及结构鉴定；同时测定了米团花多糖的体外抗氧化活性。 （1)为了优化米团花多糖提取率，通过 Box-Behnken 试验设计，选取超声功率、料液 比、超声时间作为优化因素，采用响应面分析法对超声波提取米团花多糖工艺进行了 优化。结果显示：超声功率和超声时间对米团花多糖得率有显著性影响。超声波提取 米团花多糖的最佳工艺条件为：超声功率 548 W，料液比 1:30 g/mL，超声时间 55 min， 最佳提取率为 17.59%，与预测值 17.74%拟合性较好。 （2）采用膜分离技术截留多糖，纳滤除去色素，单糖等小分子量物质；Sevage 法除蛋 白质；Sephadex LH-20 凝胶柱纯化。经过纯化色素脱除率为 98.5%，蛋白脱除率达 100%。 紫外扫描说明米团花多糖没有色素及蛋白质；薄层色谱鉴定其为单一物质。 （ 3 ） 高 效 凝 胶 色 谱 法 分 析 米 团 花 多 糖 分 子 量 及 纯 度 ， 高 效 液 相 及 超 高 压 液 相 QTOF-MS 连用分析米团花多糖中的单糖组份，电镜扫描分析其表面结构，红外光谱及核 磁共振技术分析其结构。得到了分子量为 354813 Da 米团花多糖；其单糖成分为甘露糖- 鼠李糖-葡萄糖-半乳糖醛酸-阿拉伯糖，摩尔比为：0.19:0.35:0.64:0.26:0.47。红外及核磁共 振对 LCP 进行分析，氢谱和碳谱均含有糖类的特征，说明了米团花多糖的构型为β型。 2（4）为了分析米团花多糖生理活性，对米团花多糖体外抗氧化活性进行了分析。分 别测定了米团花多糖对 DPPH 自由基、羟基（.OH）自由基、超氧自由基（O -）的清除能 2 2力，FeSO4-H2O - 2 引起的小鼠脂肝脂质过氧化反应、Fe 2+-Vc 引起的小鼠线粒体肿胀、过氧 化自由基（.H2O2）引起的血红细胞溶血的抑制能力。实验结果表明：在米团花多糖浓度为 1 mg/mL，DPPH、.OH、O2-的清除率分别为 85.48%、47.23%、77.68% ，IC50 值分别为 0.44、 5.91、0.50 mg/mL，米团花多糖能够有效的清除自由基。在多糖浓度为 1.6 mg/mL，小鼠肝 脂质过氧化、血红细胞溶血、线粒体肿胀抑制率分别为 70.82%、26.34%、86.91%，IC50 值分别为 1.17、6.83、0.82 mg/mL，说明 LCP 具有较好的抗氧化能力。 关键词 米团花；多糖；分离纯化；结构鉴定；抗氧化 I Abstract Leucosceptrum canum Smith was researched in the object. The extraction condition of Leucosceptrum canum Smith polysaccharide by Ultrasonic Wave were optimized. Isolation and purification and structure identification of polysaccharide from Leucosceptrum canum Smith and antioxidant activity in vitro were analyzed. Response surface methodology (RSM) was used to optimize the ultrasonic extraction conditions of polysaccharides from Leucosceptrum canum Smith based on the Box-Behnken design. The factors of ultrasonic power, solid to liquid ratio, ultrasonic time were analyzed. The results showed that both ultrasonic power and extraction time had significant effects on polysaccharide yield. The optimum extraction conditions were as follows: ultrasonic power 548 W, ratio of solid to liquid 1:30 g/mL, extraction time 55 min. Under the optimized conditions, the yield of polysaccharid