美罗华和tsa联合诱导b淋巴瘤细胞系凋亡机制及淋巴瘤相关基因突变的研究-内科(血液学)专业毕业论文.docxVIP

上海第二医科大学|尊：L论文中文摘要 上海第二医科大学|尊：L论文 中文摘要 非霍奇金氏淋巴瘤是一种起源于淋巴组织的异质性恶性肿瘤，NHL的标准治疗 包括放疗和化疗，有效率高，但复发率也高。再次治疗缓解率低，缓解持续时间短， 且毒副反应大，患者不能耐受，尤其是老年或合并其它疾患患者。 美罗华是一种人一鼠嵌合型抗CD20的IgGl单抗，由人IgGl恒定区与鼠单抗重链 和轻链可变区构成。尽管美罗华单药治疗NHL有效且耐受性好，但只有--4,部分病人 取得完全缓解，且其中大部分病人最终复发。曲古抑菌素A(trichostatin A，TSA)最 初被当作抗真菌药物使用，是组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylase，HDAC)抑制 剂。HDAC抑制剂可以通过抑制组蛋白去乙酰基酶(HDACs)，阻断由于HDAC募集功能 紊乱而导致的基因表达受抑，从而达到抗肿瘤效应。 本研究选用对美罗华治疗敏感的人类伴t(14：18)易位的滤泡淋巴瘤细胞系Su— DHL一4及对美罗华治疗不敏感的人类Burkitt淋巴瘤细胞系Daudi，在体外研究美罗华 与TSA联合应用诱导凋亡的效果及其可能的作用机制。 等效应线图法分析表明美罗华与TSA联合应用SU—DHL一4及Daudi细胞均有协同 作用。在两个细胞系，美罗华与TSA单用或合用可下调Bcl—xL蛋白，不下调BCL一2蛋 白的表达。在Daudi细胞美罗华下调Bcl—xL，但其下调的水平还不足以诱导细胞发生 明显凋亡，TSA单用或TSA与美罗华合用后Bcl—xL明显下调，细胞随之发生凋亡。可 以认为，Bcl—xL表达水平与淋巴瘤细胞发生凋亡的阈值密切相关。在非霍奇金氏淋 巴瘤的治疗策略中，无论是高表达BCL一2的滤泡淋巴瘤或是其它类型的非霍奇金氏淋 巴瘤，因主要以Bcl—xL为靶点，而非BCL 2。 在NF．KB组成型激活的Daudi细胞，美罗华与TSA单用或合用后可下调P65蛋 白的表达，从而可能抑制NF—K：B信号途径。 在NF．KB非组成型激活的Su—DHL一4细胞，我们发现TSA单用及合用均可使 IKB旺降解，这可能导致NF—KB的激活，且IKBⅡ反馈性调节NF—KB能力降低，从而 NF．KB信号通路可能持续激活。 TSA在NF—K B组成型激活的Daudi细胞及非组成型激活的Su—DHL一4细胞均可 下调Bcl-xL，诱导细胞凋亡。 我们的结果表明，美罗华与组蛋白去乙酰化酶抑制剂合用可能成为B细胞非霍 奇金氏淋巴瘤的又一种有效治疗方法。 另外，我们还采用PCR直接测序的方法对一些淋巴瘤相关基因突变进行了研 上海第二医科大学博二L论文究。 上海第二医科大学博二L论文 究。 在7l例淋巴瘤检测中发现1{卵JDLBCI。病人PRDMl基因的第六外显子的第44位核 苷酸AT变异是导致氨基酸改变的错义突变，使野生型PRDMl蛋白第678位氨基 酸由谷氨酰氨转变为亮氨酸，改变了PRDMJ蛋白的第二个锌指结构，有可能改变 PRDMl蛋白的功能参与淋巴瘤的发生。 在2例DLBCL s}[JlffJJMCL病人发现PRDMl基因5’调控区一616位GC突变，可 能改变了AMLl基因对PRDMl基因的调控结合位点，导致PRDMl基因的转录异常及淋 巴瘤的发生。 在EBV]jB性的NAMALWA细胞系中，我们发现PRDMl长型和短型转录本均有表达， PRDMl可能参与EBV感染导致的淋巴瘤发生。 可以认为，PROMl基因的基因突变和异常表达均可能参与淋巴瘤的发生。 关键词：淋巴瘤，美罗华，曲古抑菌素A，Bc卜xL，NF-K B，细胞凋亡 PRDMl，BACH2，BCL—XL，基因突变 上海第二医科大学博：I：论文Abstract 上海第二医科大学博：I：论文 Abstract Non-Hodgkin’s lymphoma(NHL)is a heterogeneous group of malignancies that originate in lymphoid system．The standard treatment of NHL includes radiation therapy and chemotherapy,which produces not only high response rate but also high relapse rate． Retreatment usually results in low remission rate and short time of sustaining remission． In addition，patients who old or with other disease，cann’t stand the high toxicity