慢性肾脏病患者胰岛素抵抗发生机制及其干预的研究-内科学专业毕业论文.docxVIP

万方数据 万方数据 南开大学学位论文原创性声明 本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师指导下进行研究工作所 取得的研究成果。除文中已经注明引用的内容外，本学位论文的研究成果不包 含任何他人创作的、已公开发表或者没有公开发表的作品的内容。对本论文所 涉及的研究工作做出贡献的其他个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本 学位论文原创性声明的法律责任由本人承担。 学位论文作者签名： 杨悦 2015 年 5 月 27 日 非公开学位论文标注说明 (本页表中填写内容须打印) 根据南开大学有关规定，非公开学位论文须经指导教师同意、作者本人申 请和相关部门批准方能标注。未经批准的均为公开学位论文，公开学位论文本 说明为空白。 论文题目 申请密级 □限制(≤2 年) □秘密(≤10 年) □机密(≤20 年) 保密期限 20 年 月 日至 20 年 月 日 审批表编号 批准日期 20 年 月 日 南开大学学位评定委员会办公室盖章(有效) 注：限制★2 年(可少于 2 年);秘密★10 年(可少于 10 年);机密★20 年(可少于 20 年) 摘要 摘要 摘要 目的： 研究胰岛素抵抗（insulin resistance, IR）与慢性肾脏病（chronic kidney disease, CKD）的关系，探索CKD患者发生IR的分子机制，寻找更适合CKD患者IR的干 预药物。 方法： 细 胞 实 验 部 分 将 细 胞 随 机 分 为 6 组： 阴 性 对 照 组 、 2- 脱氧葡萄糖 （2-deoxyglucose, 2-DG）组、胰岛素组、尿素组、血管紧张素Ⅱ（angiotensinⅡ, AngⅡ）组和缬沙坦组，通过尿素刺激诱发骨骼肌细胞IR，观察干预药物对骨骼 肌细胞2-DG摄取的影响。动物实验部分将大鼠随机分为4组：假手术组、模型组、 AngⅡ组和缬沙坦组，建立5/6肾切除慢性肾衰大鼠模型，在造模前及造模后不 同时间点检测大鼠肾功能、尿蛋白、血脂以及胰岛素耐量（insulin-tolerance test, ITT）等指标，观察干预药物对肾衰大鼠IR的作用。对各组细胞及组织进行western blot，检测样品中胰岛素信号通路上关键蛋白IRS-1、Akt的表达及其磷酸化情况。 最后，对钙离子拮抗剂（calcium channel blockers, CCB）、血管紧张素受体拮抗 剂（angiotensin receptor blocker, ARB）以及血管紧张素转换酶抑制剂（angiotensin converting enzyme inhibitor, ACEI ） 对 非 糖 尿 病 患 者 胰岛素敏感性（ insulin sensitivity, IS）的作用进行meta分析，寻找更适合的干预药物。 结果： 细胞实验发现，尿素刺激下骨骼肌细胞2-DG摄取下降明显（P 0.01），在 此基础上叠加AngⅡ，细胞2-DG摄取继续降低（P = 0.040），缬沙坦能部分缓解 尿素造成的2-DG摄取减少（P = 0.000）。动物实验中，与假手术组相比，模型组 大鼠肾功能（P 0.01）恶化、胰岛素耐量曲线下面积明显增加（P 0.01），血 脂显著升高（P 0.05）。AngⅡ组生化指标与模型组无明显差异（P 0.05），IS 显著降低（P = 0.047），缬沙坦组肾功能（P 0.01）、白蛋白（P 0.05）和IS（P = 0.000）均显著优于模型组。无论在体或离体实验，模型组IRS-1和Akt酪氨酸磷 酸化均较假手术组/胰岛素对照组明显降低（P 0.01），丝氨酸磷酸化则显著升 高（P 0.01）。在模型组基础上叠加AngⅡ加重异常磷酸化（P 0.05），反之， 叠加缬沙坦在一定程度上减轻异常磷酸化（P 0.05）。Meta分析结果显示，ARB I 与CCB相比，能够显著减轻非糖尿病患者胰岛素抵抗稳态模型（homeostasis model of insulin resistance, HOMA-IR）指数，而与ARB相比，ACEI缓解IR可能 疗效更佳。 结论： 慢性肾衰毒素蓄积使机体发生IR，骨骼肌IS下降，AngⅡ加重上述现象而缬 沙坦能使其部分缓解。RAS与胰岛素信号具有一段共同通路，以尿素为代表的毒 素作用于IRS-PI3k-Akt通路上关键蛋白，使其发生异常磷酸化可能是慢性肾衰患 者IR的发生机制之一。ACEI和ARB能有效改善毒素蓄积诱发的IR，可能是更适 合CKD患者的选择。 关键词： 胰岛素抵抗；毒素蓄积；慢性肾脏病；分子机制 II Abstract Abstract Abstract Objective: To investigate the relationsh