氯沙坦通过影响高血压大鼠心肌成纤维细胞间质成分抑制心室重构-药理学专业毕业论文.docxVIP

驴787780 驴787780 原创性声明 本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工 作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的 地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包 含为获得南华大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共 同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。 作者签名： 肴二哆 日期： 砸 年6月F日 关于学位论文使用授权说明 ‘本人同意南华大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有 权保留学位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论 文的全部或部分内容，可以采用复印、缩印或其它手段保留学位论文； 学校可根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文。 作者龋舢≥导师躲白神嗍埘年石月矽日 主要英文缩略语索引MMP—-2 主要英文缩略语索引 MMP—-2 matrix metalloproteinases-2 基质金属蛋白酶．2 R．AS rennin—angiotensin system 肾素．血管紧张素系统 Ang II angiotensin II 血管紧张素II Ang I angiotensin I 血管紧张素I MAPK mitogen-activated protein kinases 丝裂素活化蛋白激酶 HW heart weight 心脏重量 BW bedy weight 体重 2K1 C rats 2 ki血ey 1 clipped rats 两肾一夹大鼠 SBP Systolic blood pressure 收缩压 ATlR Angioten。sin type I receptor 血管紧张素J型受体 ARBs Angiotensin type I receptor blockers 血管紧张素I型受体阻断剂 ACEI angiotensin-converting enzyme inhibitor 血管紧张素转换酶抑制剂 ECM extracellular matrix 细胞外基质 DMSO Dimethyl sulfoxide 二甲基亚砜 CFB Cardiac fibrohlast 心肌成纤维细胞 PBS Phosphate-buffered saline 磷酸盐缓冲液 氯沙坦通过影响高血压大鼠心肌成纤维细胞间质成分抑制心室重构 氯沙坦通过影响高血压大鼠心肌成纤维细胞 间质成分抑制心室重构 硕士研究生 肖云彬 导 师 黄红林 摘 要 目的：研究氯沙坦通过影响高血压大鼠心肌成纤维细胞问质成分抑制心室重构的 药理机制。 方法：采用Spruce．Dawley大鼠建立两肾一夹型高血压模型，将大鼠随机分为对照 组、高血压组和氯沙坦治疗组。采用鼠尾动脉测压法记录每周血压变化，实验末称体 重，处死大鼠切取心脏，并计算心脏与体重比值。免疫组织化学方法测定心脏组织中III 型胶原、基质金属蛋白酶．2和JNKl／2表达。培养心肌成纤维细胞，免疫细胞化学法 鉴定细胞，MTT法测氯沙坦和An91I对细胞增殖活性影响的量效关系，Western Blo砸ng测Ang H刺激成纤维细胞心肌JNKI／2表达的时效关系。根据实验所得Ang II 刺激心肌成纤维细胞增殖活性作用的EC50值、氯沙坦抑制心肌成纤维细胞活性作用 的Ic50值和AIlgII刺激JNKI／2表达的最佳时间，心肌成纤维细胞分为无血清DMEM 组、AngIll00nM组、AngIIl00nM+losartanloonM组、losartanl00nM组，药物干 预后分别收集各组蛋白质、培养上清液， Westcm blot曲g检测各组MMP．2、ⅢK1／2 蛋白表达，ELISA检测分泌至培养上清液中MMP-2的量。 结果：左肾动脉结扎术后大鼠收缩压升高，心脏体重比值增加，心肌间质Ⅲ型胶原、 基质金属蛋白酶．2、心肌细胞JNKI／2表达增多。氯沙坦治疗能显著降低大鼠收缩压， 降低心脏体重比值，并且使心肌间质Ⅲ型胶原、基质金属蛋白酶．2、心肌细胞玳Kl／2 蛋白表达减少。AngII刺激心肌成纤维细胞活性作用的EC50为53 nM，氯沙坦抑制 心肌成纤维细胞活性作用的IC50为5613 nM。JNKl／2蛋白表达在An91I刺激2 Inin 达高峰，随后表达逐渐降低。AngII增加JNKl／2表达，氯沙坦降低AngII刺激导致的 达高峰，随后表达逐渐降低。AngII增加JNKl／2表达，氯沙坦降低AngII刺激导致的 JNKl／2表达。A_ngII组MMP一2蛋白表达较无血清DMEM组明显增高，氯沙坦降低 An91I刺激增高的MMP一2表达。AngII组MMP一2分泌较无血清DMEM组增高，氯沙 坦减少AngIIN激所致MMP-2分泌增高。 结论：氯沙坦防